确定二抗性能的三项参数
浏览次数:334 发布日期:2021-8-3
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二抗通常在各种免疫分析(例如蛋白质印迹、免疫组化和免疫细胞化学或细胞成像)中用作检测试剂。但选择适合二抗的重要性有时却会被忽略。
二抗与其他抗体一样,其被设计为靶向特异性抗原。所有二抗的靶标都是免疫球蛋白 (Ig),因此其能够结合一抗并用作免疫分析的检测试剂。所以在为实验选择适合一抗时需要考虑的诸多因素同样也适用于二抗的选择。为实验选择合适的二抗,能大大改善您的检测结果。相反,二抗问题所产生的不利影响和一抗的相当。主要通过三项参数确定抗体性能:
1. 特异性:指抗体识别对应靶抗原但不识别结构类似抗原的程度。该参数对二抗尤为重要,原因是其靶抗原为免疫球蛋白,其不同类型乃至物种之间的同源性通常较高。
2. 灵敏度:指抗体能够检出的抗原量。灵敏度不仅取决于二抗的结合亲和力(通常较高),标记本身以及抗体标记程度也很关键。
3. 一致性:指使用不同批次抗体执行分析时,结果几乎没有差异。一致性主要受抗体来源及其克隆状态的影响。