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脓肿分枝杆菌参加PCR反应的物质主要有哪五种即引物

浏览次数:460 发布日期:2021-3-24  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
脓肿分枝杆菌参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
CMP 胞苷 5’-单磷酸英文名(EN):H-Gly-Pro-PNA?P-tosylateCAS No.:65094-46-0规格(SP):1G类别(Key):通用试剂

Congo red 刚果红英文名(EN):Zinc Glycinate,≥99.0%CAS No.:1941118规格(SP):500G类别(Key):通用试剂

Coomassie brilliant blue G-250 考马斯亮兰G-250英文名(EN):Chromotrope 2RCAS No.:839148规格(SP):1G类别(Key):通用试剂

Coomassie brilliant blue R-250 考马斯亮兰R-250英文名(EN):Magnesium Glycinate,99%CAS No.:14783-68-7规格(SP):500G类别(Key):通用试剂

CPPU 氯吡苯脲英文名(EN):Calcium Glycinate,≥99.0%CAS No.:35947-07-0规格(SP):100G类别(Key):通用试剂

Cresol Red 甲酚红英文名(EN):3-Aminobutanoic acid,97%CAS No.:541-48-0规格(SP):5G类别(Key):通用试剂

CrP 磷酸肌酸钠盐英文名(EN):DL-Arginine hydrochloride,≥98%CAS No.:32042-43-6规格(SP):1G类别(Key):通用试剂

Crystal Violet 结晶紫英文名(EN):L-Arginine L-glutamate saltCAS No.:4320-30-3规格(SP):25G类别(Key):通用试剂

CTAB英文名(EN):Phenol Red sodium salt,90%CAS No.:34487-61-1规格(SP):5G类别(Key):通用试剂

CTP 5’-三磷酸胞苷二钠英文名(EN):Diazo Red RCCAS No.:68025-25-2规格(SP):25G类别(Key):通用试剂
发布者:上海研生实业有限公司销售部
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