Elisa试剂盒使用方法与实验原理

Elisa试剂盒​实验原理：

Elisa试剂盒​应用双抗体夹心法测定标本中兔基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平。用纯化的兔基质金属蛋白酶-9（MMP-9）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-9（MMP-9），再与HRP标记的MMP-9抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔基质金属蛋白酶-9（MMP-9）浓度。

Elisa试剂盒使用方法：

一、样品 RNA 的制备

1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

 
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）

2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。

3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。

4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。

5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。

质量标准：

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定显色清晰