其它试剂类注意事项与操作技巧

其它试剂类​注意事项：

１．其它试剂类反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个专用的PCR实验室。

２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。

３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

４．PCR试剂配制应使用高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。

５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。

６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。

７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

其它试剂类操作技巧：

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18 C～25℃）、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等，要先查看水育箱温度，其它试剂类是否符合要求。

2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次第要与说明书一起，否则可导致效果过错，试验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗刷次数不要逾越说明书举荐的洗刷次数，洗液在反应孑L内停留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，形成孔问污染，导致假阴性或假阳性。

4.要保证加液量一起 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，形成显色不一致，判别过错。

 5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，避免显色过强。为了减小过失，是先稀释再加样。