小鼠淋巴瘤细胞说明与步骤原理。

小鼠淋巴瘤细胞实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培育，而不适用于悬浮细胞培育，悬浮细胞可运用滴片法； 

2．所运用的盖玻片应该为优质玻璃制作，并通过铬酸洗液处理； 

3．盖玻片十分薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 

4．假如需要更多成长状况共同的细胞，可以运用较大的培育皿，但不宜过大，以避免培育液的浪
费和添加污染机率； 

5．假如细胞贴壁成长才能较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晒干。

小鼠淋巴瘤细胞操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

于细菌培养 LB Broth LB肉汤    250
用于细菌培养 LB Nutrient Agar LB营养琼脂    250
用于苯丙氨酸脱氨酶试验 Phenylalanine Deaminase  Medium 苯丙氨酸脱氨酶培养基    100
用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准) Columbia- MUG Medium 哥伦比亚MUG培养基 250
用于海生细菌的培养和计数 2216E　Agar 2216E琼脂 250
用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养(Acumedia方法) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 肠球菌琼脂(胆盐－七叶苷－叠氮钠琼脂) 250
用于培养拟杆菌 BDS Medium BDS培养基 250
用于细菌的综合生化试验 Dextrose Agar 葡萄糖琼脂 250

2.加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。