BAC打靶技术大片段人源化小鼠 — TurboKnockout基因编辑

CRISPR/Cas9技术是当前构建基因编辑小鼠的常用技术，但通常情况下，大片段的基因敲入或者人源化小鼠利用CRISPR/Cas9技术构建难度较高。此外CRISPR/Cas9技术可能出现的脱靶效应以及专利纠纷问题会对药企带来风险。

针对上述问题，赛业生物为您推荐TurboKnockout，TurboKnockout基因编辑技术建立在传统ES打靶技术之上，基因修饰准确，效果稳定，无脱靶效应，可通过BAC重组实现高达300kb的大片段基因敲入，且通过在ES水平实现多步BAC重组，可大大缩短项目周期，且与CRISPR/Cas9技术相比，TurboKnockout技术无专利纠纷困扰，是涉及新药研发项目常用的技术。

细菌人工染色体（BAC）是低拷贝载体，可容纳300kb以上的外源DNA，通过BAC同源重组或定点特异性重组的方式，达到实现用人基因组片段替代相应小鼠基因组片段的目的，是构建人源化小鼠模型的经典策略。

服务流程

Step1 打靶载体设计和构建

Step2 电转ES筛选阳性细胞

Step3 首建鼠制备

Step4 F1繁殖与筛选

服务流程

BAC重组可实现300kb大片段基因编辑
由于受DNA克隆载体容量的限制，制作基因修饰动物的外源基因片段通常小于30kb，因此某些调控基因活性的重要元素不可避免地被丢失。BAC可容纳300kb以上的外源DNA，通过BAC重组可引入更大的基因及调控序列，从而更接近于内源基因的表达模式。

TurboKnockout无脱靶效应
TurboKnockout基因敲除技术建立在传统ES打靶技术之上，基因修饰准确，效果稳定，无脱靶效应，可胜任难度较高的小鼠基因编辑。

无技术专利纠纷
与CRISPR/Cas9技术相比，TurboKnockout技术无专利纠纷困扰，是涉及新药研发项目常用的技术。

周期更短
TurboKnockout基因编辑技术建立在传统ES打靶技术之上，跨越“嵌合体”阶段并自删除Neo以减少两代繁育时间，ES打靶快至6个月。同时，TurboKnockout可在ES水平做多步BAC重组，更能缩短实验周期。