细胞转染好坏的重要因素

培养条件影响细胞转染实验的成败

1） DNA-转染试剂复合物：转染操作中复合物稀释液的PH值变化很重要（个人经验：某次转染一批细胞中，有一孔的稀释液与其他的不是同一管，结果感觉此孔的荧光比其他较强。 但是要得出结论需要反复验证，排除细胞状态差异，随机差异）。注意观察培养基颜色。

2） 培养基的“新鲜”：保证培养基的新鲜，忌讳转染实验时更换培养基体系，尽量减少试剂或添加剂的变更。

3 )营养的保证：血清、二氧化碳浓度稍微变化，会对结果有很大影响。

4 )杜绝有任何可能性污染时进行转染实验：化学物质、细菌、真菌的污染，还有细胞与细胞的交叉污染。
质粒载体DNA的质量也是转染好坏的重要因素
1)一般原则：对纯化所得的载体进行质量鉴定，在转让时一定要选用一种已知具有功能的载体做对照。
2)载体的完整性：书面报告中核实载体元件（启动子/增强子/ORI等等）。
3) 载体的制备质量：纯化质量情况，是否有其他载体交叉污染，制备产物中残余的污染物（如氯仿、酒精、CsCl、内毒素）可能会影响转染效率。