BIOG细胞RNA抽提试剂盒使用说明书
运输条件：常温运输
货 号：51021: 50次反应
51022: 100次反应
产品特点
◎操作简便快速，可在半小时内完成操作；
◎提取RNA纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.8-2.0；◎产率高，同样的样本量提取的RNA更多；
◎标本范围宽，适合于各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本；
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂，安全无毒。
试剂盒组成
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组分 |
50次 |
100次 |
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吸附柱和收集管 |
各50个 |
各100个 |
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裂解液 |
12 mL |
24mL |
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析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
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洗涤液 |
9 mL |
18 mL |
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洗脱液 |
12mL |
24 mL |
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消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
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说明书 |
1份 |
1份 |
产品介绍
BIOG RNA Cell Kit是我公司研发的专门用于从各种细胞样本中提取基因组RNA的试剂盒。提取的样本范围包括各种培养细胞、细菌、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本。BIOG RNA Cell Kit采用复合消化液消化细胞中的蛋白质，使细胞RNA更容易释放出来，因而本试剂盒RNA提取产率较高。BIOG RNA Cell Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的RNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤：
1.请自行准备：无水乙醇、PBS及无RNA酶的1.5mL离心管。
2.取出析出液和洗涤液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。
b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。
c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
3.细胞处理：a) 培养板培养的单层贴壁细胞，弃培养基，PBS清洗一遍，弃PBS；
b) 培养瓶培养的贴壁细胞应先用胰酶消化，处理为细胞悬液， 1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮；
c) 培养的细胞为悬浮细胞，1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮。
4.加入200μL裂解液，20 μL 消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。
5.加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
6.将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
7.将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
8.将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9.取出吸附柱，放入新的无RNA酶的1.5 mL 离心管内，加入50-200μL 洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2 分钟，收集RNA溶液。
10.-70℃保存，或直接用于下一步实验。
注意事项
- 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。
- 析出液、洗涤液均含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
- 细胞量建议不高于107。
- 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。
储存、运输和有效期
本试剂盒可常温运输，室温（15-25℃）保存，有效期为12个月，消化液请于-20℃存放，避免反复冻融。
质量控制
本产品经严格的质量检验证明，无生物污染
注意 本产品仅用于科研实验
常州百代生物科技有限公司
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