ELISA试剂盒生产流程及注意事项

1. ELISA试剂盒生产流程

2,包被

2.1 将包被抗原用包被缓冲液配制包被液，每孔取100 mL加入酶标板，盖好盖板膜，包被条件如下表，4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放，而37℃ 2h包被时酶标板之间的间距应保持一致（一般为5cm）。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距，如培养箱从底部产热，则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。

2.2  包被加样采取吸二打一的方式，应避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断，若应加入，则小心振荡使其落入孔底，反之则用吸水纸小心吸出，并注意不可溅出，不可产生气泡。

2.3  包被前预吸查看枪头是否合格，水流是否一致，不一致者应更换枪头，包被应采用优质枪头，每包被一块板，应将枪头套紧，并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致，在包被过程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。

2.4 若采用37℃ 2h包被模式，则应给酶标板编码，保证每块板子的包被时间一致。

3，洗板

3.1 包被后要进行两次洗涤，250微升/孔，洗涤完毕后，应在毛巾上拍干参与液体，并及时进行下一步封闭。

3.2 洗涤时要注意查看水流是否一致，在洗涤程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。

4，封闭

4.1 封闭液应提前一小时取出初步回温，用前摇匀，每孔取180 mL加入酶标板，盖好盖板膜，37℃封闭 1.5h, 酶标板之间的间距应保持一致（一般为5cm）。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距，如培养箱从底部产热，则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。

4.2  封闭加样采取吸一打一的方式，应避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断，若应加入，则小心振荡使其落入孔底，反之则用吸水纸小心吸出，残留在枪头内的溶液不要打出 以免产生气泡。并注意不可溅出，不可产生气泡

4.3 封闭前预吸查看枪头是否合格，水流是否一致，不一致者应更换枪头，封闭应采用优质枪头，每封闭一块板，应将枪头套紧，并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致，在封闭过程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。

5，烘干装袋

5.1 封闭完后，摔倒孔内液体，并在毛巾上拍干，接下来采取烘干或者晾干的方式彻底干燥酶标板。烘干：37 ℃倒置（不加盖板膜或用自封袋），每5块板烘干30 min，随着板子数量增多时间相应延长，如100块板，需要烘3 h，依次类推；晾干：底部铺一层干净的A4纸或者吸水纸，倒置板子，在顶层铺一层盖住避光，室温晾18-24h。

5.2 板子干燥后，应及时装入自封袋，按照每块板1袋干燥剂的量装入，袋子外面写好板子制备日期，放入本成品库冷藏环境保存备用。