牙髓组织的分离

牙髓组织的分离

试剂和材料：
1. 无镁和钙的PBS平衡盐溶液（PBSA）；
2. MSC培养基：含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM，添加15%胎牛血清，0.1mmol/L左旋抗坏血酸磷酸盐，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素；
3. 培养皿；
4. 精细镊（小号和大号）；
5. 牙科碳化钻头；
6. 牙挖器；
7. 高速牙科手机；
8. 使用高速牙科手机时的装备（如空气压缩机）；
9. 消毒液（如聚维酮碘）；

实验方法：
1. 用PBSA洗三遍，充分清洁牙齿表面；
2. 用消毒液消毒，然后再用PBSA充分清洗；
3. 用连接牙科手机的牙科碳化钻头，沿骨质和釉质的结合处切开牙齿，然后暴露髓腔。间歇地将牙齿在用冰预冷的PBSA中浸泡，避免切割过程中过热。在SHED分离时，有时由于牙根吸收牙髓已经暴露了，就不需要进行这个步骤；
4. 用小号精细镊或牙挖器，轻轻从牙髓腔中分离牙髓组织；
5. 将牙髓组织放入培养皿中的少量MSC培养液中。注意不要使组织变干；