cDNA文库构建

服务概述：
我们拥有丰富的建库经验和成熟的实验方法，在cDNA合成、消化、连接及转化等方面拥有成熟的技术，建成的文库全长cDNA比例高，可用于大规模基因测序和目的基因的筛选。

cDNA文库构建原理和材料说明：
本制品是根据美国Stratagene公司的cDNA说明书，并采用Stratagene公司的配套试剂盒，使用的材料为用户提供的新鲜植物(动物)组织材料，制作而成的文库。在制作文库时，以带有XhoI酶切位点的oligo(dT)Linker Primer为反转录引物，再在双链cDNA片段的5’端加EcoRI adaptor, 然后酶切、过柱去除小片段后克隆到ZAP表达载体中，用Gigapack III Gold 包装蛋白进行包装。外源基因在噬菌体中可得到表达，该cDNA文库可以用抗体来筛选基因；同时，噬菌体又可以转化为质粒，直接用于测序等分子生物学操作。

技术要点：
1、Total RNA抽提及mRNA纯化是最关键的第一步，必须保证mRNA的完整性。
2、 cDNA第一链长度太短或产量太低是克隆cDNA的常见问题。我们拥有专业的实验人员，能保证建成的文库cDNA全长比例高，平均长度≥1kb。
3、连接效率直接影响着cDNA文库质量，我们能保证连接效率。

样品要求：
材料要求新鲜、RNA不能降解；所需要的最低的mRNA为10-12g。

完成时间：
材料送到起45天内完成。对于有些RNA提取困难的材料或样品材料本身质量问题，时间要长一些，会在1周内和客户协商约定时间。

结果报告内容：
1、 产物电泳图谱。
2、 初始库，保存在-20℃。
3、 文库评价的数据，包括库容量，滴度，插入片段的平均长度，重组效率。
库容量：初始基因文库的滴度在1 ×106 以上；如果需要扩增，保证扩增后滴度在109 左右，容量大于1 ×105，平均长度大于1kb，重组效率大于90%。

上海沪晶生物科技有限公司座落于浦东张江高科技园区内，是上海生物芯片公司旗下的销售公司。
上海生物芯片公司是由上海创业投资有限公司、中科院上海生命科学研究院、中科院上海微系统与信息技术研究院、复旦大学、交通大学、上海第二医科大学附属瑞金医院、上海第二军医大学附属东方肝胆医院、国家人类基因组南方研究中心、上海博星基因芯片有限公司、上海华冠生物芯片有限公司和上海复旦张江生物医药股份有限公司等十一家发起单位共同出资组建而成。2003年2 月，公司被国家计委批准建设“生物芯片上海国家工程研究中心”。