抑制性消减杂交

   抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization， SSH)技术是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术. 其原理是以抑制性多聚酶链反应(PCR)反应为基础的cDNA 消减杂交技术. 通过合成两个不同的接头，连接于测试cDNA 片段的5’末端，达到选择 
性扩增差异性表达的cDNA 片段，抑制非目的cDNA 的扩增. 该技术与其他消减杂交技术相比具有假阳性率低、敏感性高、效率高等优点而得到广泛应用。 
基本流程：通过差减文库构建，文库验证和筛选 ( 逆向斑点杂交 ) ，获得阳性克隆 (表达差异基因），对阳性克隆测序及生物信息分析，可判定差异基因的情况。另外结合 RACE及 RT-PCR 、 Northern blot 或实时定量 PCR 可进一步克隆并验证所获得的差异基 因cDNA全长序列。 
　   

 成功案例：已经成功构建过人，大鼠，小鼠，鲤鱼，多宝鱼，红树，百合，土豆，香蕉, 海洋藻类 …… 等十几个物种的差减文库。通过以上工作逐步建立起规范的服务标准和 可控的质量体系，技术日臻成熟。注意事项：客户需提供实验所需的样品（组织，细胞或 RNA ）。样品需求量：组织（ 200～ 400mg ），细胞（ 10^7 ） , 总 RNA(>10ug) ， mRNA （ >1ug ）   

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