基因抑制
实验内容描述:
目标基因在指定宿主细胞中抑制表达,然后分析细胞形态、生长、调亡、周期、相关基因表达变化等代谢生化指标。
客户需提供以下信息
基因名称 种属 genebank号 片段大小 GC含量
基因是否已克隆、如已克隆载体是什么,提供测序序列
指定的表达载体 启动子要求 是否加融合蛋白如His、Myc、GFP等,是否加kazak序列等。
选用何种载体质粒或病毒
指定何种宿主细胞,是否提供
过表达后监控细胞周期 调亡
过表达后监控哪些研究基因的表达变化,核酸还是蛋白水平。
研究哪些生理代谢指标。
实验流程:
候选RNAi片段载体构建
转染质粒制备:
筛选有效shRNA载体
转染:提供转染数据图谱。
调亡数据
周期数据
基因表达数据核酸(定量PCR)
蛋白(western blot)
整合株筛选:目标基因核酸检测数据、蛋白western blot 检测数据。细胞荧光照片。
服务方提供:每一步的证明材料。
验收标准:分步依次验收,分步支付。
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