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乐备实LabEx提供专业的PLA可视化蛋白互作--检测服务--仅提供样本，且目前乐备实已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、电化学发光、液相微阵列、蛋白芯片、抗体芯片、PCR Array、ELIS
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邻近连接分析（Proximity Ligation Assay, PLA）：一种基于抗体特异性识别靶蛋白、通过抗体偶联寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大的蛋白互作检测技术。其核心原理是当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时，抗体偶联的寡核苷酸可通过连接酶形成可扩增的 DNA 片段，最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号（每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子）。
可视化蛋白互作(PLA)实验流程
抗体-A+抗体-B结合目标蛋白 → DNA探针靠近 → 连接 → 扩增 → 信号检测
1） 封闭样本
2） 一抗孵育： 两种一抗分别与位于一种蛋白质或两种邻近蛋白质上的目标表位结合
3） Navenibody孵育： Navenibodies（与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体）与各自的一抗结合
4） DNA circle形成： 当 Navenibodies 靠近时 ， 附着的寡聚物能形成 DNA circle ，通过减少非特异性背景染色来保证高特异性5） 扩增和检测 ：加入聚合酶后 ， 就会启动 滚环循环扩增过程。 标记的探针与扩增的 DNA结合 ， 显色形成亮点
实验结果图示例：
样本处理：
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样本类型 |
预处理方式 |
运输方式 |
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新鲜组织样本 |
多聚-甲醛固定24-72h |
加冰袋，冷藏运输 |
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石蜡组织块 |
石蜡包埋，请标明组织排列方向 |
加冰袋，冷藏运输 |
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石蜡组织切片 |
用防脱载玻片拷片，组织应在靠近切片下端1/3处；按分组编号，排列在玻片盒中 |
封口，防震打包，室温运输 |
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冰冻组织切片 |
冰冻样本包埋前需做固定处理（4%多聚-甲醛/10%中性福尔马林），需客户切片，按分组编号，排列在玻片盒中 冰切厚度：5-10μm |
封口，防震打包，干冰运输 |
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细胞爬片 |
使用孔板专用细胞爬片，经固定15-30min后PBS洗2-3次，保存在PBS中，用封口膜密封孔板；孔板盖上应有位移的标记 |
常温运输，快递运输时写上正面朝上 |
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抗体 |
建议提供原管抗体，若需分装，请提供不少于10μl；同时提供抗体品牌、货号，如有验证过的条件，请一并提供 |
干冰运输（除非抗体有明确规定需要采用其他运输方式） |
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备注：可提供组织石蜡包埋、切片服务，冰冻样本请直接提供切片；建议提供三个月内的切片，如切片放置时间过久，易导致抗原靶点检测不出。 |
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详情点击→ https://www.u-labex.com/detail-lx-pla.html?mk_channel=SWQC
