哺乳动物稳定转染细胞系构建

通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术，将靶基因被导入细胞后，一般在转染后48小时，靶基因即在细胞内表达。根据不同的实验目的，48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验（即瞬时转染）。如若建立稳定的细胞系，则可对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，最常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。筛选后可以得到稳定表达外源基因的细胞克隆，这就是稳定转染。稳定转染的质粒DNA整合到染色体上，使得转染的细胞可长期表达。

（1）服务流程
1）筛选浓度测定：以10-14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度。
2）细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。
3）细胞转染
4）抗生素筛选
5）鉴定筛选结果

（2）您需要提供
1）构建好的外源基因载体
2）待转染的细胞系（1*106个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）
3）关于细胞培养条件的说明

（3）我们提供
构建好的稳定细胞系及相关的外源基因表达分析

        从2008年开始，上海锐赛生物开展生物技术服务已有六年多，多次被客户和业内媒体评为优秀技术服务供应商。

       在长期的合作、学习和改进中，锐赛生物已经形成了在细胞和病毒领域的专业优势，长于转化医学整体项目的设计与实验，专注于与各知名三甲医院、高校和科研院所的技术合作。围绕热门的恶性肿瘤与重大疾病方向，锐赛生物为广大医学专家和科研工作者提供整体实验设计、细胞、病毒、分子和检测等方面的技术服务。
       公司位于张江高科技园区，由一群海内外从事科学技术研究和生物技术产业化研发的专业人士共同创立。锐赛同时还开发实验室用和医疗类的专利产品，并积极寻求业内合作伙伴，推进技术服务行业的进步与新技术产业化。