小鼠组织裂解液炎症10因子分析系统

一、产品概述

二、核心检测指标及生物学意义

 

三、技术平台：液态流式（Luminex）技术

 

1. 技术原理
   以荧光编码微球为载体，每一种微球内部包含两种比例独特的荧光染料，可区分 100 种不同的微球类型；每种微球表面偶联针对特定炎症因子的特异性抗体，与样本中的目标因子结合后，通过生物素标记的检测抗体及链霉亲和素 - PE（荧光报告分子）形成 “三明治” 复合物，最终通过激光检测微球编码荧光（识别因子类型）和报告荧光（定量因子浓度）。
2. 核心优势
   • 高通量并行检测：一管样本可同时分析 10 种因子，大幅减少样本消耗量（仅需 25-50μL 组织裂解液）；
   • 高灵敏度：检测下限低至 pg 级，可捕捉组织中低丰度炎症因子的细微变化；
   • 高特异性：基于特异性抗体结合，交叉反应率 < 5%，确保结果准确性；
   • 高效性：96 孔板设计，单次实验可完成多达 96 个样本的 10 因子检测，缩短实验周期。

四、适用样本类型及处理要求

1. 核心适用样本

 

• 实质器官：肝、肾、肺、脾、脑、心脏等组织裂解液；
• 黏膜组织：肠道、呼吸道、皮肤等组织裂解液；
• 肿瘤组织：移植瘤、自发瘤等肿瘤组织裂解液。

2. 样本处理要求

• 取材：新鲜组织需快速冻存（-80℃）或立即裂解，避免室温放置超过 30 分钟；
• 裂解：使用含蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液（如 RIPA buffer），冰上匀浆后 4℃离心（12,000×g，15 分钟），取上清即为组织裂解液；
• 储存：短期（1 周内）可存于 4℃，长期需分装冻存于 - 80℃，避免反复冻融（建议≤3 次）；
• 质量控制：确保裂解液无溶血、无沉淀，蛋白浓度建议在 0.5-5mg/mL（可通过 BCA 法预检测）。

五、检测流程

1. 样本接收与预处理：收到样本后核查标记及状态，对浑浊样本进行二次离心处理；
2. 预实验（可选）：针对首次检测的样本类型，通过梯度稀释确定最佳检测浓度（减少基质效应干扰）；
3. 实验操作：微球与样本孵育→洗涤→加入检测抗体→孵育→洗涤→加入链霉亲和素 - PE→孵育→上机检测；
4. 数据分析：通过 Luminex 软件生成标准曲线，计算样本中各因子浓度，输出原始数据及质控报告；
5. 结果交付：3-5 个工作日内（不含预实验）提供检测报告，包含浓度值、标准曲线、重复性验证结果。

六、产品优势

1. 针对性优化：专为小鼠组织裂解液设计，减少组织基质（如胶原蛋白、蛋白酶）对检测的干扰；
2. 全面覆盖炎症网络：10 种因子涵盖促炎 / 抗炎平衡、免疫细胞调控、趋化信号等多个炎症通路；
3. 高性价比：96 孔板设计支持多样本并行检测，单样本检测成本低于单因子 ELISA 试剂盒；
4. 专业技术支持：提供样本处理方案咨询、数据解读及实验设计建议。

七、常见问题解答

1. Q：组织裂解液中的高浓度蛋白会影响检测结果吗？
   A：可能会。高浓度蛋白可能导致非特异性结合，建议通过预实验确定最佳稀释倍数（通常 1:5-1:20 稀释），或使用蛋白去除柱处理高丰度蛋白。
2. Q：能否检测固定后的组织样本？
   A：不建议。甲醛等固定剂会破坏蛋白结构，导致因子失活，仅支持新鲜或冻存的未固定组织。
3. Q：检测结果的重复性如何？
   A： intra - 板变异系数（CV）<10%，inter - 板 CV<15%，符合国际多因子检测标准。
4. Q：可以增加其他炎症因子检测吗？
   A：支持定制扩展，可在 10 因子基础上增加 IL-17、IL-23 等因子（需提前咨询货期及价格）。
5. Q：如果样本量不足，能否减少检测体积？
   A：最低检测体积为 10μL，但会降低检测灵敏度，建议尽量保留 25μL 以上样本。

上海乐备实生物技术有限公司，简称乐备实(LabEx)，是上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司，主要专注于提供多组学/多因子相关检测分析的实验服务专家，目前已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、电化学发光、液相微阵列、蛋白芯片、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、多色免疫组化等30+个技术平台。已经为超过3000个客户提供服务，累计检测样本超过100万，受到了广大客户的赞赏。