Western Blot实验

 

原理：与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

Western Blot显色的方法主要有以下几种：

i. 放射自显影
ii. 底物化学发光ECL
iii. 底物荧光ECF
iv. 底物DAB呈色
现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。
MDL让科研更简单！
MDL为您提供科研CRO一站式服务，方案评估、方案设计、方案执行、报告整理以及后续SCI写作与发表等，全程实验技术服务。MDL自有实验室超过6000平米。聚焦基础科研、动物模型、细胞模型、组学服务、生物信息学、基因检测、细胞增殖、细胞周期凋亡、细胞培养、病毒包装,稳定株筛选、原代细胞分离、流式检测、平板克隆、划痕、侵袭迁移、WB、蛋白抽提、蛋白定量、蛋白质纯化、蛋白双向电泳、明胶酶谱、定量pcr、荧光定量PCR服务、包埋切片爬片、免疫组化、免疫荧光等医学科学基础研究与转化医学的研究。08年至今我们与科研人员共同完成12000+课题。在课题设计、课题执行、试剂采购、动物造模、标本检测、报告整理以SCI科研文章指导投稿等方面积累了丰富的经验。用户可以参与实验，实验过程中有任何疑问，我们均提供技免费术支持，欢迎来我公司参观考查。
 
 
实验热线：19931682702（同微信）

立足于生物医学实验、快速检测一站式技术服务，是很早推出整体实验外包的专业服务机构。经过10余年的发展，我们与国内超过百余家的研究机构上千名研究人员共同完成了12000+的实验项目,在中国生物医药实验技术服务领域极具行业影响力。我们自行建设了动物实验平台，细胞生物学平台，分子生物学平台，蛋白免疫平台，病理平台，以及快速检测平台。我们已有6000平米的研究中心，能够承载更多更广泛的医学研究工作。服务项目: 动物实验相关、WB、IP和Co-IP服务、明胶酶谱、细胞增殖、细胞培养、细胞周期凋亡、平板克隆、免疫荧光、免疫组化、常规及特殊染色、包埋切片爬片、定量pcr、elisa检测服务、普通生化试剂盒检测、全自动生化检测项目、硬组织切片技术服务、P2实验室动物实验等。
联系电话：19931682702