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PPI震惊实验步骤
震惊反射实验广泛应用于药品毒性、生理听觉系统、神经和行为遗传的研究。啮齿类动物的研究在研究药效或评价震惊可塑性的神经生物机理方面都是方便和有效的。
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最后更新:2023-9-15半年访问:64
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分为训练和测试两阶段
(一)训练阶段(第一天)
1.调试仪器,以确保格栅地板有电流刺激,扩音器有声音刺激,并分别记录电流强度和声音强度(分贝)。
2.将大鼠放入条件恐惧箱2min(A相),记录这最初2min内动物的凝滞(freezing)时间作基线。
3.接着加入卡嗒声,80Db,30s(B相)。
4.紧接着再给予电击,0.35mA,2s(C相),完成一轮训练。如需要多轮训练,则重复A、B、C三相训练即可。
5.记录整个训练阶段动物凝滞时间(s),用以测量动物的非条件恐惧(unconditioned fear)。
6.将大鼠移开操作箱。用70%的酒精或4%醋酸溶液彻底清洁操作箱,以备进行下一批动物的训练。
(二)测试阶段 在训练后的第二天进行,包括关联(context)测试、变更关联(altered context)或条件刺激前(pre-conditioning-stimulus,pre-CS)测试以及条件刺激(conditioning stimulus,CS)测试。测试阶段没有电击刺激。关联测试和变更关联测试中也没有听觉条件刺激,但每只动物所用的操作箱应与训练阶段的相同。
1.关联测试 将动物放入箱内,计算机自动记录动物的凝滞行为。若用人工观察,则观察者(应不知道动物的处理或基因型)用静声秒表通过箱门上的猫眼(小窗口)观察动物的行为并计分:凝滞为1分,活动(moving)为0分(也有只记录凝滞时间)。每10秒观察一次,共5min,这样可记录到30次(bout)可能的凝滞(即最大凝滞得分为30分)。用在这一阶段记录到的、动物在同一操作箱内的凝滞时间测量动物的关联条件恐惧(contextually conditioned fear)。此为关联测试。观察结束后将动物放回笼内,清洁操作箱,进行下一只动物的观察。
 
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