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抗体重组表达
获得安全的、稳定的、高效率的接近天然的重组抗体至关重要,对于常规的多克隆或单克隆抗体制备技术来说,几乎是不可能逾越的难题。重组抗体表达技术使制备人源化抗体和人源抗体成为水到渠成的工作。
服务类别:免疫与抗体总访问:1495
最后更新:2018-9-28半年访问:68
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服务商: 南京钟鼎生物技术有限公司 查看该公司所有服务 >>
  • 服务介绍
  • 公司简介

 抗体药物工程是一类交叉领域的复杂工程,涵盖生物信息学、药理学、代谢组学、分子生物学、免疫学、蛋白表达纯化技术等多学科范畴,钟鼎生物在整个环节中,扮演的最擅长的基于重组蛋白表达的角色,因为专业,我们才可以把工作做到极致!

 

抗体重组表达服务种类
 

 

杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务概述
 

  钟鼎生物拥有完善成熟的哺乳动物蛋白表达平台,结合抗体纯化、亚型鉴定、抗体测序、重组抗体亲和力成熟(如需服务请参考相关案例文件)等先进平台能为客户提供优质的重组抗体表达服务,包含鼠源单克隆抗体构建及表达、更换恒定区亚型的嵌合抗体表达,抗体人源化改造及表达等服务。

  1. 钟鼎拥有专门的哺乳动物细胞蛋白表达实验平台和抗体制备技术平台,可以实现实验无缝对接,让项目一体化,流程均一化
    成为可能,在时效上和质量上有保证。
  2. 丰富的抗体表达载体资源让我们的抗体表达服务如虎添翼,只需要提供重链及轻链可变区序列,亚克隆至特定的表达载体
    中,即可开始表达项目。最重要的是,我们免费提供哦!
  3. 成熟的序列优化技术,配合HEK293改良细胞系,最大程度激发表达潜能,常规瞬时转染小试产量在10~100mg/L,小试高产量
    有利于节约成本,提高商业化应用潜能。

抗体重组表达平台
 

钟鼎生物重组抗体表达平台属于国内领先的服务平台,以首席科学家Dr.Louis领衔的技术团队拥有超过20年的哺乳动物蛋白表达经验和免疫学背景,我们配套了标准的万级细胞房,使用非动物源性培养基,全流程使用进口试剂耗材,在获得了抗体轻(重)链可变区的前体下,为了获得高产量的,高特异性的重组抗体蛋白,我们会在多个方面进行资源调配和合理优化,获得的每一管抗体蛋白都经过严格的质量评价。

昆虫细胞蛋白表达设备及实验室

 

  1. 根据抗体亚型和应用要求,选择恰当的恒定区骨架质粒。目前,我们可以提供小鼠、人、兔等物种的的恒定区骨架质粒,通过重组无缝克隆方式将可变区基因连入表达载体,无需客户重新基因合成或调取。可变区测序时,尽可能挑取多个阳性克隆,确认序列无误。
  2. 我们筛选出来有多条高效率的抗体分泌信号肽,一般情况下我们使用来自于利钠肽V5高效信号肽进行分泌表达,当抗体部分泌或产量偏低时,我们可能会设计并构建多种信号肽的表达质粒平行试验,筛选最佳的信号肽方案。
  3. 配合我们的抗体表达质粒,我们会有针对性的选择293和CHO相关细胞系,并摸索最佳的细胞转染条件,实现转染试剂品牌与用量、细胞培养成本、表达量的最佳配比,以期达到最经济科学的实验条件。
  4. 常规实验设计中,我们根据FC的信息会选择Protein A/G对重组抗体进行纯化,不会添加额外的融合标签,对于高纯度要求的抗体,使用AKATA进一步纯化,根据纯度和量的要求额外加收费用。
  5. 常规的科研级别抗体表达订单中,客户可免费使用我们的表达体系,但我们最终只交付抗体终产物,不赠送表达体系及关键的技术信息。(合作开发项目另议交付标准)

钟鼎生物抗体表达载体列表

产品编号 载体名称 载体骨架说明 纯化方案
AVH-1101 pAZ-V5-hCH-IgG1 Human IgG1 重链恒定区 Protein A / G
AVH-1102 pAZ-V5-hCH-IgG2 Human IgG2 重链恒定区 Protein A / G
AVH-1103 pAZ-V5-hCH-IgG3 Human IgG3 重链恒定区 Protein A / G
AVH-1201 pAZ-V5-hCH-IgM*3 Human IgM(allele 3) 重链恒定区 Protein G
AVH-2101 pAZ-V5-hCL-IgGκ Human IgGκ 轻链恒定区 *
AVH-2102 pAZ-V5-hCL-IgGλ1 Human IgGλ1 轻链恒定区 *
AVH-3106 pAZ-V5-h-IgG1Fc Human IgG1 Fc片段 Protein A
AVM-1101 pAZ-V5-mCH-IgG1 Mouse IgG1 重链恒定区 Protein A / G
AVM-1102A pAZ-V5-mCH-IgG2A Mouse IgG2 重链恒定区 Protein A / G
AVM-2101 pAZ-V5-mCL-IgGκ Mouse IgGκ 轻链恒定区 *
AVM-2102 pAZ-V5-mCL-IgGλ1 Mouse IgGλ1 轻链恒定区 *
AVM-3108 pAZ-V5-m-IgG1Fc Mouse IgG1 Fc片段 Protein A

 

抗体重组表达服务流程及报价
钟鼎生物抗体表达平台采取的是双质粒共转悬浮细胞为基础的实验策略,最终形成以自然结合成四聚体的天然构象蛋白,经过变性胶和非变性胶的双重检测,如果客户可以提供抗体特异性抗原,我们也可使用Western Blot检测。

 

抗体重组表达载体

 

 

抗体重组表达技术服务(基于293 CHO表达系统)

抗体重组表达步骤及交付标准
1、表达体系系统选择(客户提供表达质粒的请告知质粒信息及元件说明)
可选表达载体
pAZ-V5相关系列载体 其他商业化的载体
可选表达宿主 
HEK293 CHO 或其他商业化的载体
2、载体构建 实验周期 交付数据及材料 报价
  • A:序列分析优化
    亚克隆设计
    合成基因
    B:亚克隆至pAZ-V5系列载体

基因合成
2周左右
亚克隆
1-2周

1、基因合成报告
2、测序验证报告

重组抗体蛋白表达服务属于科研型服务项目,为了给您提供更专业、细致的服务支持

请联系order@zoonbio.com

免费电话
400-066-8086

或咨询QQ技术支持在线QQ技术支持2

3、细胞转染表达 实验周期 可交付数据及实验材料
  • C:无内毒素质粒提取
    D:细胞瞬时转染
    E:表达小试,条件优化
    F:表达分析鉴定(SDS-PAGE)
    G:ELISA效价检测

细胞转染
1周
表达鉴定
1-2周

5、瞬时转染的细胞裂解液
(如提供需增加费用)
6、细胞上清小样
(如提供需备注说明)
7、表达分析报告

4、纯化抗体鉴定 实验周期 交付数据及实验材料
  • H:Protein A/G亲和纯化
    I:重组抗体鉴定
表达鉴定
1-2周
8、纯化、分析鉴定报告
9、重组蛋白(10 -100ug,85%纯度)
5、放大培养及蛋白纯化 实验周期 交付数据及实验材料
  • J:放大培养(1-2L)
    K:Protein A/G亲和纯化
    L:纯化抗体检测
    M:抗体分装发货
放大培养
2-3周
表达纯化
1-2周

10、蛋白纯度鉴定报告 
11、成品蛋白(依据表达小试结果约定)

 详情请关注钟鼎官网http://www.zoonbio.com/

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