qPCR 细胞内源表达检测预实验
qPCR 基因表达检测预实验用于检测目的细胞中目的基因mRNA水平的表达丰度,以确认RNA干扰正式实验的可行性和实验参数,如果目的细胞中目的基因的表达丰度低甚至不表达,则该细胞不适用于后续RNAi的细胞学实验。 服务优势
服务流程
服务说明
Real-time PCR 预实验范例 收集生长状态良好的目的细胞(A和B细胞),提取RNA并反转录得到cDNA,并以该cDNA为模板,用针对目的基因以及内参基因设计合成的Real-time PCR引物进行扩增(采用Biorad IQ5 Real-time PCR仪,Sybr Green法完成实验),以检测细胞中目的基因mRNA水平的表达。 检测结果如下(A细胞为黑色曲线,B细胞为红色曲线):
熔解曲线和电泳图显示引物扩增特异性良好。Ct值原始数据显示A、B细胞actin表达丰度基本一致,B细胞目的基因表达丰度低,A细胞目的基因表达丰度相对更高,所以A细胞更适合作为靶细胞进行后续RNAi实验。
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吉凯基因成立于2002年,是一家以转化医学为核心模型的创新诊疗产品开发公司。 在国外,转化医学是创新药物形成的成熟模式,但在中国仍处于起步阶段。致力于与研究型医生共同解决中国特有、高发疾病的新药研发难题,开发属于中国人自己的创新药物,吉凯基因积极接轨国际成熟的创新药物形成模式,潜心深耕17年,目前已建成从基础研究到临床前研究再到临床研究的完整研究开发体系,形成独一无二的转化医学系统。 吉凯基因总部位于上海张江,目前在职员工超过500人,其中50%以上具有硕士学位,10%以上具有博士学位;拥有涵盖组学研究平台、载体制备平台、细胞与动物模型构建平台在内的全面基础科研平台以及1500m2的标准化GMP车间,可针对不同医生的临床科研需求展开合作,并协助研究型医生高效、高质的形成研究成果,目前已累计参与10000多篇SCI文章的基础科研工作,并申请专利121项,其中获得授权62项;PCT专利申请5项,其中获得美国授权2项。 基于工程化、系统化、产业化的专家系统及技术平台,吉凯基因与全国超过90%的研究型医院建立了良好的信任合作关系,累计助力研究型医生超过30%,在合作中不断加深对疾病机制的深刻理解,并发现数百个在中国特有、高发肿瘤中发挥关键作用的候选靶标基因,建成吉凯独特的疾病关键基因数据库,形成吉凯基因丰富的临床资源。 临床资源是吉凯基因新药开发的基础,吉凯基因在中国开创性地应用从疾病标志物及靶标发现、靶点验证到药物开发,最终到临床试验的全链条新药开发流程,与研究型医生共同进行基因治疗、细胞治疗以及抗体药物新靶标的研究,并挖掘具有开发转化前景的项目,利用自身所具备的新药开发能力,进行新药研发以及后期的成果转化。其中,CD19-CART在顶尖三甲医院进行的超过30例临床试验中获得极好的安全性及疗效,目前该项目已进入IND申报阶段,同时多个血液瘤和实体瘤项目也与临床医生共同推进至临床研究阶段。 “致力转化医学,共创健康明天”,吉凯基因将建立“以终为始”的基因诊疗品种创新创制平台,开发中国高发、少药和难诊疾病的先进诊疗产品,让患者因为吉凯的努力获得更高的五年生存率!
合作成果
作为基因功能研究的专业技术服务公司,吉凯基因为中国生命科学领域的科学家和医药企业提供了诚信和优质的服务。中国生物医学领域科学家发表的国际高质量科学论文中,截止2015年12月底,已经有近3000篇使用了吉凯基因的产品和服务,包括发表在Cell(影响因子33.116),Nature(影响因子42.351), Nature Neuroscience(影响因子14.976), Neuron(影响因子15.982)等杂志上的文章。应用案例中,详细列出了这些文章。
技术及研究资源
Affymetrix全基因组表达谱和miRNA芯片平台;
高效shRNA文库构建技术平台;
cDNA文库构建技术平台;
慢病毒、腺病毒、腺相关病毒的构建、包装和纯化技术平台;
基因作用靶点快速筛选技术平台;
药物作用靶点快速筛选技术平台;
稳定表达细胞株构建技术平台;
转基因小鼠平台。
市场覆盖
经过多年的努力,公司和遍及全国各地的、近300家3级甲等医院的临床科研工作者建立了稳固、持续的合作关系。