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HiFi-C技术,融合Hi-C实验与PaBio测序平台的核心优势,通过交联、酶切、连接、SMART Bell DNA文库制备及HiFi测序等关键步骤,可高效获取长读长、高质量的基因组三维互作信号。
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HiFi-C实验步骤:
1.交联固定:甲醛交联,使空间邻近的DNA片段通过结合蛋白交联形成复合物;
2.酶切连接:用限制性内切酶消化染色质,连接形成互作产物,解交联后纯化DNA;
3.建库测序:构建SMRT Bell DNA文库,通过PacBio Revio测序平台高通量测序
HiFi-C组装策略:
1.T2T基因组2.0版:有助于解决着丝粒区域,rDNA区域的正确组装;
2.大基因组:有助于大基因组重复序列挂载;
3.二倍体分型基因组:有助于同源染色体准确分型;
4.多倍体基因组:有助于同源染色体准确分型。
HiFi-C应用优势:
1.数据深度要求少(20-30X),分析周期快;
2.能验证组装结果,辅助同源多倍体分型;
3.在高重复区域(例如SD重复)、着丝粒区域有更强的互作信号,更有利于T2T组装;
HiFi-C互作优势:
1.HiFi-C可同时检测多位点互作,助力chromatin hub研究;
2.HiFi-C可准确获取基因组上重复区域互作,为揭示等位特异性调控机制提供新思路;
3.HiFi-C可以全面捕获强度较弱的互作。
菲沙基因提供多种三维基因组和表观遗传技术服务,涵盖Hi-C、Micro-C、HiChIP、Capture Hi-C 、4C-seq、ATAC-seq、ChIP-seq、CUT&Tag(组蛋白修饰、转录因子、R-loop结构)、HiCuT、WGBS、Tn5-FISH、Hi-R等。同时紧跟科研前沿,推出表观图谱、泛三维基因组等全方位解决方案。
至今,菲沙基因已完成包括动物、植物和微生物在内的数百个物种数千个项目的三维基因组学和表观遗传学实验及数据分析服务。其中,利用创新的三维基因组学技术和表观遗传学技术助力动物、植物和微生物研究成果见刊于《Nature》、《Science》、《Cell》、《Bone Research》、《Nature Cancer》、《Nature communications》等国际顶级期刊,应用领域涉及到疾病分子机制、生物种质资源的育种研究、微生物的基因组结构和功能研究等。菲沙基因期待与您的深度合作!