慢病毒包装

汉恒服务项目

汉恒生物科技（上海）有限公司提供慢病毒载体构建、RNAi(shRNA)、miRNA、过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。详情可查询：病毒现货库

整体实验流程

（一） 实验流程（1、2、3为并列步骤）

1. 慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，采用PCR技术(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（cDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。

2. 慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体。

3. miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。

4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒（两质粒包装系统），三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染293T细胞，转染后6 h 更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。

（二）流程图

提供产品

汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]是一家专门从事生物技术服务和产品销售与研发的高科技企业，公司专注于为广大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆转录病毒包装、细胞稳定株筛选、siRNA设计和microRNA研究服务。汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]自成立之日起，就以“为客户提供最优质的服务和品质卓越的产品”为宗旨，凭借国际先进的实验设备和经验丰富的实验技术人员，获得了中国顶级病毒包装供应商的美誉，是全国唯一一家可以提供病毒现货的公司。汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]提供的产品和服务具有产品质量好、滴度高、服务优及周期短等特点。