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Southern Blot
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法
服务类别:分子与细胞总访问:1089
最后更新:2014-12-18半年访问:71
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 方法步骤

以哺乳动物基因组DNA为例,介绍Southern印迹杂交的基本步骤

1、 待测核酸样品的制备

2、 琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品

3、电泳凝胶预处理

4、转膜

5、探针标记

6、预杂交(prehybridizafion)

 

 

 

southern印迹杂交实验仪器

7、Southern杂交

8、洗膜

9、放射性自显影检测

结果注意

在膜上阳性反应呈带状。实验中应注意以下问题:转膜必需充分,要保证DNA已转到膜上。杂交条件及漂洗是保证阳性结果和背景反差对比好的关键。洗膜不充分会导致背景太深,洗膜过度又可能导致假阴性。若用到有毒物质,必需注意环保及安全。

主要应用

1.遗传病诊断

2.DNA图谱分析

3.PCR产物分析

服务周期       45个工作日

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