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金源科生物专业提供环肽合成服务,多肽内引入二硫键,或使用Acm修饰Cys,阴止二硫键的形成。有任何问题,欢迎咨询。
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二硫键是很多蛋白质立体结构中不可或缺的组成部分。我们几乎可以在所有的胞外肽类和蛋白质分子中发现这些共价键。当一个半胱氨酸的硫原子与位于蛋白质不同位置的另一半胱氨酸的硫原子形成共价单键时,一个二硫键就形成了。这些键有助于稳定蛋白质,特别是那些从细胞中分泌的蛋白质。
一个二硫键的有效形成涉及多方面,包括对半胱氨酸的恰当管理、对该氨基酸残基的保护、保护基团的脱除方法和配对方法等。
如果多肽中只含有1对Cys,那二硫键的形成是简单的。多肽经固相或液相合成,然后在pH8-9的溶液中进行氧化。
当需要形成2对或2对以上的二硫键时,合成过程则相对复杂。尽管二硫键的形成通常是在合成方案的最后阶段完成,但有时引入预先形成的二硫化物是有利于连合或延长肽链的。使用最广泛的Cys的保护基团有Bzl、Meb、Mob、tBu、Trt、Tmob、TMTr、 Acm、Npys等。
S-acetomidomethyl(Acm)在酸和碱中都非常稳定,因此,Acm与Boc和Fmoc化学成份都是兼容的。一些保守的半胱氨酸残基对蛋白-蛋白结合和蛋白-蛋白相互作用至关重要。部份研究利用Ala替换Cys来破坏二硫键结构。另外还可以利用Acm修饰Cys,这种修饰会阻止二硫键的形成,同时还保持蛋白中Cys的结构。