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热点实验服务:凝胶电泳迁移率(EMSA)实验服务案例介绍
嘉美公司提供凝胶电泳迁移率(EMSA)等实验。
服务类别:分子与细胞总访问:1239
最后更新:2015-5-20半年访问:228
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小鼠XX细胞药物干预及核因子蛋白A凝胶电泳迁移率(EMSA)检测

实验分组:
A组
对照组(DMEM 1000ul)                     
B组 A药物组(DMEM 960ul+A药物40ul )           
C组 A药物+B药物组(DMEM 892.5ul+ A药物40ul+B药物 67.5ul)
D组 B药物组(DMEM 932.5ul+B药物 67.5ul) 
注:培养基与B药物,2小时候加A药物,24小时后收集细胞检测。


实验试剂:LightShift Chemiluminescent EMSA Kit(PIERCE,20148);Chemilumi-Nucleic Acid Detection Kit(PIERCE,89880);NF-KB p65探针序列;Boitin-N4-CTP(invitrogen,15918-18);TdT(NEB,M0252L);Poly(dI.dC) (sigma,P4929);Hybond-N+ 尼龙膜(Amersham,RPN303B);6×Loading Buffer (TAKARA)


实验仪器:离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司,TG16-W);电泳电源:Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323);电泳仪及附件:Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell (BIO-RAD,Catalog#165-3301);电转仪及附件:Mini Teans-Blot Elecreophoresis Transfer Cell (BIO-RAD,Catalog#170-3930);


生物素标记探针:
1、按如下顺序加入反应物,温和混匀,切勿涡漩
   超纯水                          25μl
   5×TdT Reaction Buffer         10μl
   探针(1μM)                     5μl
   Biotin-N4-CTP                  5μl
   TdT (2U/μl)                   5μl
   37℃反应30分钟
2、加入2.5μl 0.2M EDTA终止反应
3、加入50μl 酚:氯仿,短暂涡漩,15000g离心2min,保留上层水相,-20℃保存。
4、结合反应前等体积混合两条标记引物,90℃退火引物,并自然冷却至4℃,待用。

详细实验信息请参考以下链接:

www.jiamay.net/vshow_28_1884.html

 

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