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CHIP-seq技术
ChIP-Seq序列与参考基因组序列的比对,Peak Calling,Peak Annotation,Motif预测、基因集分析,全基因组范围的峰值分布,基因组水平和感兴趣区域的数据可视化。
服务类别:测序/合成总访问:2177
最后更新:2013-9-3半年访问:60
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  • 服务介绍
  • 公司简介
简介:染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)也称结合位点分析法,是研究体内蛋白质与DNA 相互作用的有力工具,通常用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究。将ChIP 与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq 技术,能够高效地检测全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段。 ChIP-Seq 的原理是:首先通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段,并对其进行纯化与文库构建;然后对富集得到的DNA 片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA 区段信息。
二、信息分析

 

1.原始数据整理、过滤及质量评估
2.ChIP-Seq序列与参考基因组序列的比对
3.Peak Calling(统计每个样品的Peak片段信息)
4.Peak Annotation(根据已有的基因组数据库注释信息获得所有Peak位点信息)
5.Motif预测、基因集分析。
6.全基因组范围的峰值分布
7.基因组水平和感兴趣区域的数据可视化。

 

三、送样要求

 

1.样品质量要求:ChIP DNA OD260/280应在1.8至2.0之间。DNA片段大小在100~500bp范围内,主带明显,建议在250bp左右,同时请提供DNA打断时的检测胶图。样品最好经过ChIP-PCR验证。
2.样品浓度要求:样品量≥60ng(3次),浓度≥200pg/ ul。若单次ChIP后DNA量不够,建议将2~3次ChIP的DNA合并在一起。
3.样品包装:样品溶于超纯水中,放于DNase-free的1.5ml离心管中,管口用封口膜封号。请在样品管上做好清楚的标识,最好写在标签纸上,贴在管壁。
4.请仔细填写样品信息表,并且请同时提供质量检测相关数据和图片,包括分光光度、电泳胶图或Nanodrop仪器检测数据等。同样品一起送样。
5.样品运输:DNA样品请用干冰或者冰袋运输。干冰运输时间不要超过72小时;冰 袋运输,时间最好不要超过24小时。

 

四、应用领域
 
由于ChIP-Seq 的数据是DNA 测序的结果,为研究者提供了进一步深度挖掘生物信息的资源,研究者可以在以下几方面展开研究:
1.判断 DNA 链的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰;
2.检测 RNA polymerase II 及其它反式因子在基因组上结合位点的精确定位;
3.研究组蛋白共价修饰与基因表达的关系;
4.CTCF 转录因子研究。
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