RNA干扰实验

 逆转录RT-PCR

步骤一  确定检测基因，准备检测组织或细胞，设计并合成引物。
步骤二  总RNA提取，纯度检测。
步骤三  逆转录-PCR实验，琼脂糖凝胶电泳。
步骤四  照相采图，测定条带灰度值或吸光度值。

RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程，小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解，阻断相应基因表达。为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段（SiRNA）和构建载体RNA（SnRNA）两种形式，客户只需提供干预基因名称或基因序列ID，我们免费设计合适的干预位点，保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达，抑制效率不低于70%。
RNA干扰流程
步骤一  确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA）。
步骤二  预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB，PCR等），确定干预效果最佳的一对小RNA。
步骤三  正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。
步骤四  转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。
RNA干扰检测   
细胞检测      细胞增殖毒性MTT   细胞凋亡   细胞周期   细胞迁移   细胞侵袭
蛋白检测      免疫印迹WB   免疫细胞化学ICC   免疫荧光IF 
流式细胞术FCM     酶联免疫ELSIA
分子生物检测  RT-PCR   实时荧光定量PCR   甲基化特异性PCR(MSP)
生化检测    酶类检测    脂类检测    糖类检测

北京泰诺达科贸有限公司是一家以提供科技服务、生物实验外包、提供实验室设备及耗材的新科技型企业，依托清华大学、中国农业大学、中国军科院、中国医学科学院药物所等科研机构联合开发新技术。北京泰诺达科贸有限公司不仅为大专院校、科研机构、企事业单位提供优质的科研仪器，并且提供一流的技术咨询和技术服务。