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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
该试剂盒利用免疫学中的抗原-抗体特异性反应。微孔板（固相载体）上预先包被了针对人EGR3的特异性抗体（捕获抗体）。整个反应过程大致如下：
加样与结合：将标准品或待测样本（血清、血浆、细胞裂解液等）加入微孔中，样本中的EGR3抗原与板上固定的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合：加入生物素（Biotin）标记的检测抗体，它会与EGR3抗原的另一位点结合，形成“固相抗体-EGR3抗原-生物素标记抗体”的复合物（即“夹心”结构）。
酶标结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（Avidin）。由于亲和素与生物素具有极高的亲和力，HRP会结合到复合物上。
显色反应：加入TMB底物溶液。HRP催化TMB显色，溶液由无色变为蓝色。
终止与读数：加入终止液（通常为硫酸），溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中EGR3的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值）。
产品属性
主要产品性能
参数项目 典型指标范围 说明
检测范围 62.5 - 4000 pg/mL 也有部分品牌提供 0.313 - 20 ng/mL 的版本，需根据样本浓度选择。
灵敏度 < 37.5 pg/mL 最小可检测剂量，反映试剂盒的检测下限。
特异性 高 可检测天然及重组EGR3，不与其它EGR家族成员（如EGR1, EGR2）发生交叉反应。
加样与结合：将标准品或待测样本（血清、血浆、细胞裂解液等）加入微孔中，样本中的EGR3抗原与板上固定的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合：加入生物素（Biotin）标记的检测抗体，它会与EGR3抗原的另一位点结合，形成“固相抗体-EGR3抗原-生物素标记抗体”的复合物（即“夹心”结构）。
酶标结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（Avidin）。由于亲和素与生物素具有极高的亲和力，HRP会结合到复合物上。
显色反应：加入TMB底物溶液。HRP催化TMB显色，溶液由无色变为蓝色。
终止与读数：加入终止液（通常为硫酸），溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中EGR3的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值）。
产品属性
| 产品名称 | 人早期生长应答因子3(EGR3)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E031364 |
| 英文名称 | Human Early Growth Response Protein 3(EGR3)ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测范围 62.5 - 4000 pg/mL 也有部分品牌提供 0.313 - 20 ng/mL 的版本，需根据样本浓度选择。
灵敏度 < 37.5 pg/mL 最小可检测剂量，反映试剂盒的检测下限。
特异性 高 可检测天然及重组EGR3，不与其它EGR家族成员（如EGR1, EGR2）发生交叉反应。
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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