人运动因子相关蛋白1(MRP1)ELISA试剂盒
检测原理:
该方法的检测信号强度与样品中MRP1的浓度成正比。具体步骤如下:
固相包被:将特异性识别MRP1的捕获抗体预先包被在酶标板的微孔中。
抗原结合:向微孔中加入待测样本(或标准品),样本中的MRP1抗原会与固相上的捕获抗体特异性结合。
洗涤:洗去未结合的其他蛋白和杂质。
结合检测抗体:加入生物素(biotin)标记的检测抗体,它会与已结合在固相上的MRP1抗原的另一个表位结合,形成“固相抗体-抗原-检测抗体”的夹心复合物。
酶标结合:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素(Avidin),它会与检测抗体上的生物素高亲和力结合。
显色反应:加入TMB底物溶液,固相上结合的HRP会催化底物显色(通常为蓝色),加入终止液后变为黄色。
结果判读:样本中MRP1浓度越高,形成的夹心复合物就越多,最终显色越深。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并与标准曲线对比,即可计算出样品中MRP1的浓度。
产品名称:
人运动因子相关蛋白1(MRP1)ELISA试剂盒
英文名称:Human Motility Related Protein(MRP1)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031328
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
性能参数 典型范围/数值 说明
灵敏度 0.16 ng/mL 指能检测到的最低MRP1浓度。
检测范围 0.313 - 20 ng/mL 指能准确定量的浓度区间,部分产品支持定制。
精密度 批内CV < 10%
批间CV < 15% CV(变异系数)用于衡量检测结果的重复性,数值越小越稳定。
特异性 高 指只与人MRP1反应,与其他结构类似的蛋白无明显交叉反应。
样本处理要求:
1、血清:全血室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟取上清;可暂存于-20℃或-80℃,避免反复冻融
2、血浆:推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集,采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟,取上清检测
3、组织匀浆:用预冷PBS冲洗组织去除残留血液,按1:9(重量:体积)比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨,超声或反复冻融辅助裂解后,5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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