人B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA试剂盒
检测原理:
该试剂盒的检测原理基于抗原-抗体的特异性反应,具体步骤如下:
包被与捕获:微孔板已预先包被了能特异性结合人Bcl-xl的捕获抗体。
抗原结合:向微孔中加入待测样本(如血清、血浆等)和标准品。样本中的Bcl-xl抗原会与板上的捕获抗体结合。
检测抗体结合:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,它会与已结合的Bcl-xl抗原的另一位点结合,形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”的三明治复合物。
洗涤与显色:彻底洗涤以去除未结合的物质。随后加入底物TMB,在HRP的催化下,TMB转化为蓝色产物。
终止与检测:加入终止液使反应停止,溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中Bcl-xl的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线即可计算出样本中Bcl-xl的浓度。
产品名称:
人B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA试剂盒
英文名称:Human Bcl-xl ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031109
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同品牌试剂盒的性能参数可能存在差异,以下是基于现有资料整理的参数示例:
性能参数 品牌A示例 品牌B示例
检测类型 定量夹心法 双抗体一步夹心法
检测范围 5 ng/mL - 160 ng/mL 未在资料中提供
灵敏度 < 10 pg/mL 未在资料中提供
精密度 板内、板间变异系数均 < 15%
检测流程简要:
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书a要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
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注意事项:
标准曲线:每次实验都必须重新制作标准曲线,不可沿用旧数据。
洗涤步骤:洗涤不充分是导致误差的主要原因,需严格按照说明书洗板(通常3-5次)。
用途限制:此类试剂盒通常仅供科研使用,不可用于临床诊断
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