玉米BT176 PCR检测试剂盒

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销售商：上海谷研实业有限公司

产品概述

本试剂盒用于转基因玉米品系Bt176的特异性核酸片段检测，采用PCR技术（或荧光探针法，视具体型号而定），适用于食品、饲料等样品中转基因成分的定性分析，最低检出限为0.1%。

产品组成

核心组分

反应液：含引物、探针（荧光法）、酶、dNTP及缓冲体系。

阳性对照：Bt176特异性DNA片段（非活体样本，需按说明书稀释使用）。

阴性对照：无靶标核酸的缓冲液。

辅助试剂（部分型号需自备）

稀释液、染色液（常规PCR）、溶解液等。

适用仪器

PCR仪：常规PCR仪或荧光PCR仪（如ABI 7500、CFX 96等）。

配套耗材：灭菌离心管（1.5mL/2.0mL）、PCR八联管、移液器（1-1000μL）、冰盒、涡旋混匀器等。

操作步骤

样本处理

使用研磨器具均质化样品，提取DNA后稀释至适宜浓度。

阳性对照稀释（示例）

按10倍梯度稀释阳性对照（10²~10⁷拷贝/μL），每步更换枪头避免交叉污染。

反应体系配制

按比例混合模板DNA、反应液、酶及Mg²⁺（具体体积参考试剂盒标注）。

PCR程序

预变性：95℃ 5分钟。

循环参数：95℃ 30秒→退火（55-60℃）30秒→72℃延伸30秒（35-40循环）。

荧光法：需在延伸阶段采集荧光信号。

结果判读

常规PCR：通过凝胶电泳分析扩增条带（预期片段200-500bp）。

荧光PCR：根据扩增曲线Ct值判定（阴性样本无信号或Ct值≥预设阈值）。

注意事项

防污染：操作分区（样本处理、PCR配制、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

技术原理

基于引物与Bt176特异性DNA序列互补结合，通过PCR扩增靶片段。引物设计遵循：

长度20bp左右，扩增跨度200-500bp（特定条件可达10kb）。

荧光法采用探针标记，实时监测扩增动态。
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