西美杰现货供应Applichem支原体检测/清除/预防产品

浏览次数：1692　发布日期：2015-5-5　来源：本站　本站原创，转载请注明出处

德国Applichem提供支原体检测/清除/预防全系列产品，给您的细胞更多的安全与保护

为什么要重视细胞培养中的支原体污染？

您的实验结果是否能保证没有受到支原体污染的影响？

世界性难题！！！！Nature最新发布细胞研究领域中支原体污染问题严重性

Ewen Callaway. Contamination hits cell work. Nature, 29 July 2014; doi:10.1038/511518a

污染率高：在细胞研究领域，支原体是臭名昭著的污染源，二十世纪九十年代的支原体污染率是四分之一，而目前有仍然有超过十分之一的基因表达研究（许多曾发表在顶尖杂志上），表现出支原体污染的迹象。

影响日趋严重：虽然支原体污染并不一定意味着研究结果无效，但它会影响数百个基因的表达，并与细胞竞争营养阻碍细胞的生长。在目前测试的一组受污染的数据中（淋巴瘤细胞），已经鉴定出61个被支原体改变的基因，干扰了实验结果。这无疑是对时间，资源，经费极大的浪费；

难察觉：支原体污染完全是不留痕迹的，污染后的细胞生长速率一般并未发生显著的影响，无法用肉眼识别，除非采用专门的支原体检测方法检测；

污染源多：“草率操作”、细胞系流通的交叉污染、操作人员自身都是很重要的污染源；

难去除：支原体体积小，无细胞壁，约有1%的支原体可通过过滤器，且一般抗生素根本无法有效抑制或者去除支原体，另外，部分抗生素使用后会对细胞产生敏感效果，从而影响细胞的状态；

重视程度日益增加：顶尖杂志发表实验结果需验证支原体污染影响，在国际上，支原体污染检测已经日益成为细胞培养污染常规检测之一，有效规避细胞支原体污染。

支原体检测系列

传统的支原体检测方法包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、DNA荧光染色检测以及PCR检测，除PCR检测方法以外，其他检测方法大多耗时长，要求检测人员具有丰富的经验，并且无法获得足够的灵敏度和特异性，对于一些稀有的支原体亚种无法有效检测。

Applichem设计的支原体检测试剂盒系列产品均是基于PCR方法，根据支原体16S rRNA保守序列设计引物，经过PCR反应扩增其16S rRNA片段，后采用琼脂糖电泳方法检测270bp条带。相对传统方法而言，具有强大优势：

高灵敏度：敏感度高达100~1000CFU/ml，仅需要0.5 - 1.0 ml细胞上清样本即可检测；

检测品种广泛：可检测常规品种，同时对于稀有亚种也能同效检测，如M. pneumoniae, Acholeplasma laidlawii, M. synoviae, M. pulmonis, M. bovis，几乎覆盖自然界80余个品种；

快速：操作时间只需30分钟，全程5个小时内即可得到检测结果；

污染样本与对照的琼脂糖检测结果

1、DNA marker (100bp DNA ladder)

2、 negative control

3、 positive control

4、 inhibited sample

5、 negative sample

6、 contaminated, positive sample

7、strongly contaminated positive sample

可靠：试剂盒中包括有阳性对照DNA，可保证

实验结果的可重复性，减小因操作而带来的误差；

安全性：无支原体培养过程，有效避免污染扩大；

产品型号	检测方法	适用仪器	试剂盒组分
PCR Mycoplasma Test Kit （货号A3744）	普通PCR-电泳检测	普通PCR仪器	Reaction Mix Buffer Solution Positive Template Control
qPCR Mycoplasma Test Kit （货号A9019）	荧光定量PCR	LightCycler®1.2, 1.5, 2.0, 480, Rotor-Gene™ 3000, 6000, ABI Prism® 7000, iCycler iQ®, iQ™5, Opticon 2, Chromo 4, MX300P®, MX4000®.	Primer/Probe/Nucleotide Mix(RED) Rehydration Buffer(BLUE) Positive Control DNA(GREEN) Internal Control DNA(YELLOW) PCR Grade Water(WHITE)

支原体清除系列

对于普通细胞系，遭受污染以后可以通过重新复苏，购买等途径更换样本，但是对于一些较难获得的样本，如干细胞，原代细胞，经过特殊处理的，或订购困难的细胞，一旦遭受支原体污染后，一定要马上进行处理。Applichem研发的支原体清除的Myco系列产品，可以直接整合到质膜上破坏支原体的完整性，从而有效的清除支原体污染，并可以针对不同程度，不同细胞样本进行针对性处理，处理过程简单，对细胞不会造成任何副作用。

名称	主要成分	适用样本	使用方法
Myco-3 （货号A5240）	环丙沙星	贴壁细胞，可清除大多数支原体污染	100倍稀释加入培养基，每2-3天换液，连续处理14天
Myco-1 （货号A5222）	泰妙菌素	贴壁细胞，配合能解决顽固型支原体或者使用Myco-3处理停用后又出现支原体污染的情况	100倍稀释加入培养基，与Myco-2配合使用，使用Myco-1处理4天后换Myco-2处理3天，如此重复2-3次即可
Myco-2 （货号A5233）	二甲胺四环素	贴壁细胞，配合能解决顽固型支原体或者使用Myco-3处理停用后又出现支原体污染的情况	100倍稀释加入培养基，与Myco-2配合使用，使用Myco-1处理4天后换Myco-2处理3天，如此重复2-3次即可
Myco-4 （货号A8366）	专利配方	贴壁细胞，悬浮细胞，病毒培养物	1瓶起始液和3瓶维持液配合使用

细胞污染预防系列

有效保护细胞的最好方式是对于细胞培养环境的预防，如工作环境定期消毒处理，严格实验操作，保证器皿无菌等各方面。在实验室中，CO2培养箱，C02培养箱水盘，水浴锅是非常重要的污染源。Applichem研发有系列污染预防系列产品专门针对这3大污染源，可有效预防真菌（及芽孢）、细菌、病毒等污染。使用方便，无腐蚀性，安全高效。

名称	适用环境	预防微生物	使用方法
Incubator-Clean (货号A5230）	CO2培养箱工作台	支原体，真菌及芽孢、细菌、病毒（包括HIV，HBV等）	即用型，喷雾处理完全湿润即可，无需转移出细胞，建议每2周处理一次
Incuwater-Clean （货号A5219）	C02培养箱水盘	支原体，真菌及芽孢、细菌、病毒（包括HIV，HBV等）	100倍稀释加入水盘灭菌水中，建议每2-4周更换灭菌水
Aquabator-Clean （货号A9390）	水浴锅	细菌，真菌	100倍稀释加入水浴锅，建议每1-2周向水浴锅加入一次，每4-6周给水浴锅更换一次水

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