贝克曼发布11月离心文献快报-订阅赢精美礼品！

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一项采用超速离心技术的研究表明，病毒样颗粒 (VLPs) 疫苗可同时引起细胞和体液免疫应答。该研究发现，获得的新型SVA VLP具高度的免疫还原性，其VLP疫苗提供的保护水平与灭活的SVA疫苗水平相似，从而为防御和消除SVA提供比灭活疫苗更优的候选疫苗。Potent Protective Immune Responses to Senecavirus Induced by Virus-Like Particle Vaccine in Pigs (病毒样颗粒疫苗对猪引起的塞内卡病毒的强保护性免疫反应) Vaccines, 15 September 2020, 8, 532.

•  仪器型号：Beckman XPN-100 Ultracentrifuge, SW 41 Ti rotor.

•  目的：SVA VLPs的制备及表征。

•  离心条件参数：4 C, 110 000 x g, 3 h.

DOI:10.3390/vaccines8030532

2、

一项采用超速离心技术的研究运用多重定量蛋白质组学方法确定在用以共生纯化病毒样颗粒(VLP)的细胞外泌体(EVs)的分泌物中发生的变化。在共同生产的部分中，与免疫激活，抗炎过程和应答氧化反应相关的蛋白质（免疫调节蛋白如ITGB1，ENO3和PRDX5）被鉴定出来, 这些发现提供了VLP胞外环境性质以定义EVs特征及其蛋白质谱的深刻见解，对开发新下游分离策略或将其用作病毒治疗佐剂具有潜在意义。Molecular Characterization of the Coproduced Extracellular Vesicles in HEK293 during Virus-Like Particle Production (病毒样颗粒生产过程中，于HEK293细胞中生成的共生细胞外泌体的分子表征) Journal of proteome. 25 September, 2020, 19, 4516-4532.

•  仪器型号：Beckman L100 XP Centrifuge, SW 32 rotor.

•  目的：制备高度浓缩纯化的HIV-1 Gag VLPs样品。

•  离心条件参数：4 C, 31 000 rpm, 2.5 h.

https://dx.doi.org/10.1021/acs.jprote me.0c00581

3、

一项采用超速离心技术的研究介绍了三种新型以重组型水疱性口炎病毒（rVSV-ZEBOV）为载体的HIV候选疫苗，并在Vero细胞中对三种疫苗的生产进行小规模评估。研究发现，Vero细胞上的生产动力学取决于所用HIV gp表面蛋白，纯化的病毒制剂符合WHO对残留DNA和宿主细胞蛋白质含量的限制。最后，在小鼠实验中，所有三种rVSV-HIV候选疫苗均可诱导HIV gp140特异性抗体应答。Evaluation of novel HIV vaccine candidates using recombinant vesicular stomatitis virus vector produced in serum-free Vero cell cultures (利用无血清Vero细胞培养物中产生的重组水泡性口炎病毒载体对新型HIV疫苗候选物进行评估) Vaccine, 1 November, 2020.

•  仪器型号：Beckman Optima 80XP Ultracentrifuge, 70 Ti rotor.

•  目的：制备并纯化用于动物实验的VSV构建体。

•  离心条件参数：30 000 rpm, 3.5 h.

https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.10.058

4、

一项采用超速离心技术的研究中，研究者利用低温电子断层扫描(cryo-ET)技术对受体结合蛋白在与受体结合的膜形成复合物时，其促发F介导的融合的逐步过程进行剖析。借用可促进直接从上清液中检查新鲜的，具有生物活性的病毒株的网格抗体捕获方法，以及一系列可在融合过程中捕获中间状态的生物学工具，研究者可以直观地看到当一个原始的，真实的病毒颗粒与目标受体相互作用，及从病毒结合受体的侵入到膜融合的过程。Human parainfluenza virus fusion complex glycoproteins imaged in action on authentic viral surfaces (人副流感病毒融合复合糖蛋白在真实病毒表面的作用中的成像) PLOS Pathogens, 21 September, 2020, 16(9): e1008883.

•  仪器型号：Beckman L8-80 M Ultracentrifuge, SW 28 rotor.

•  目的：病毒样品制备与纯化。

•  离心条件参数：4 C, 25 000 rpm, 4 h.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1008883

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一项采用密度梯度超速离心技术的研究测试了pH 6-8的溶液中铜（Cu）和银（Ag）对模型RNA和DNA病毒MS2和PhiX 174的影响。结果表明，铜和银的组合使用在pH 7的MS2消毒中的显示了协同作用。Inactivation of RNA and DNA viruses in water by copper and silver ions and their synergistic effect (铜和银离子对水中RNA和DNA病毒的灭活作用及其协同作用) Water Research X, 5 November, 2020.

•  仪器型号：Beckman Optima L-90 K Ultracentrifuge, SW41 Ti rotor 和SW60 Ti rotor.

•  目的：MS2和PhiX 174噬菌体的制备及纯化。

•  离心条件参数：4 C, 32 000 rpm, 20 h.

https://doi.org/10.1016/j.wroa.2020.100077

1、

一项采用超速离心技术的研究探讨了自噬激活的髓核细胞（NPC）和体外分泌microRNA产生的外泌体对髓核（NP）基质降解的保护作用, 并阐述了自噬如何参与预防椎间盘退化（IDD）的新机制。Autophagy‐activated nucleus pulposus cells deliver exosomal miR‐27a to prevent extracellular matrix degradation by targeting MMP‐13 (自噬激活的髓核细胞可递送外泌体miR-27a通过靶向MMP-13来防止细胞外基质降解) Journal of Orthopaedic research, 10 October 2020, 1-12.

•  仪器型号：Beckman L-100 XP Ultracentrifuge.

•  目的：外泌体分离。

•  离心条件参数: 120 000 g, 2 h.

DOI: 10.1002/jor.24880

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一项采用差异超速离心(Differential ultracentrifugation)技术的研究表明，特定的外来体亚型是在Rab11家族成员标记的Drosophila二次细胞和人类癌细胞回收内体多囊泡体中制成的。 此外，Rab11a标记的外泌体从这些区室的优先释放是由耗尽外源谷氨酰胺的癌细胞触发的。Glutamine deprivation alters the origin and function of cancer cell exosomes（谷氨酰胺的缺失对癌细胞外泌体源头及功能的改变）The EMBO Journal. 28 July, 2020.

•  仪器型号：Beckman 55.2 Ti or 70 Ti rotor.

•  目的：细胞外泌体分离。

•  离心条件参数: 4 C, 100 000 -108 000 g, 2 h.

DOI 10.15252/embj.2019103009

3、

一项采用超速离心技术的研究评估了脂质和跨膜酶CD73在刺激皮肤伤口愈合过程中外泌体生物活性中的参与。Exosomes for Wound Healing: Purification Optimization and Identification of Bioactive Components (外泌体用于伤口愈合: 外泌体纯化的优化和生物活性成分的鉴定。) Advanced Science. 2020; 1-16.

•  仪器型号：Beckman Optima XE-90 Ultracentrifuge, Type 45 Ti fixed-angle rotor.

•  目的：细胞外泌体分离。

•  离心条件参数: 4 C, 100 000 x g or 150 000 x g, 70 min.

DOI: 10.1002/advs.202002596

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一项采用超速离心技术的研究首次证明了长角血蜱在唾液中分泌类似于外泌体的胞外囊泡并对其进行蛋白质组学分析，表明血蜱唾液衍生的外泌体样囊泡在宿主-寄生虫关系中可能起重要作用。Proteomic Analysis of Exosome-Like Vesicles Isolated From Saliva of the Tick Haemaphysalis longicornis (从长角血蜱唾液中分离出的外泌体样囊泡的蛋白质组学分析) Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 22 October 2020, Volume 10: 542319.

•  仪器型号：Beckman Optima L-100 XP Ultracentrifuge, SW 60 (44.5) rotor.

•  目的：H. longicornis唾液中外泌体的分离。

•  离心条件参数: 1. 初步分离：4 C, 140 000 g, 3 h； 2. 洗涤参数：150 000 g, 2 h； 3. 非连续性梯度离心: 250 000 g, 18 h.

DOI: 10.3389/fcimb.2020.542319

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一项采用超速离心技术的研究使用静电力显微镜通过探测单个囊泡来研究神经母细胞瘤分泌的囊泡的物理特性。有趣的是，我们观察到当将更高浓度的Aβ42低聚物培养细胞时，外泌体的表面电荷就会更高。该结果表明，随着细胞培养基中Aβ42浓度的增加，外泌体包含更多的Aβ42，这暗示这些外泌体可能充当Aβ42的转运囊泡。Nanoelectrical characterization of individual exosomes secreted by Aβ42-ingested cells using electrostatic force microscopy (使用静电力显微镜对由Aβ42摄取的细胞分泌的单个外泌体进行纳米电表征) Nanotechnology. 12 October, 2020, 32 025705.

•  仪器型号：Beckman Optima L-90 K Ultracentrifuge, Type 70 Ti rotor.

•  目的：细胞外泌体分离。

•  离心条件参数: 4 C, 100 000 x g, 2 h.

https://doi.org/10.1088/1361-6528/abba58

1、

一项采用超速离心技术的研究提供了原理证明，以进一步促进对自主组装的混合脂质纳米颗粒的研究，将其作为核酸的有前景的递送工具，例如miRNA。Hybrid lipid self-assembling nanoparticles for brain delivery of microRNA (用于microRNA的大脑递送的自主组装的混合脂质纳米颗粒) International Journal of Pharmaceutics, 02 August 2020, 588 119693.

•  仪器型号：Beckman Optima Max E Ultracentrifuge.

•  目的：将miRNA装载入自主组装的混合脂质纳米颗粒。

•  离心条件参数: 4 C, 80 000 rpm, 40 min.

https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2020.119693

2、

一项采用超速离心技术的研究中，详细描述了一种互补的无细胞蛋白质合成（CFPS）方法，为制备水通道蛋白脂蛋白体样品提供了三种不同的策略。Functional Analysis of Aquaporin Water Permeability Using an Escherichia coli-Based Cell-Free Protein Synthesis System (使用基于大肠杆菌的无细胞蛋白质合成系统进行水信道蛋白水渗透性的功能分析) Materials Today Bio, 31 July, 2020, 100071.

•  仪器型号：Ultracentrifuge and suitable rotors (Beckman Coulter).

•  目的：蛋白质样品（水信道蛋白及无细胞蛋白质）的制备及纯化。

•  离心条件参数: 1. （水信道蛋白的制备及纯化）4 C, 20 000 x g, 30 min. 2. 用于脂质-无细胞蛋白质合成反应的样品制备：18 000 x g, 30 min (初步分离); 18 000 x g, 10 min (分离制备).

DOI: 10.3389/fbioe.2020.01000

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一项采用超速离心技术的研究通过生化和NMR方法表征了Vav2-SH2结构域与脂质和Y594磷酸化EphA2 JM的结合。这项研究提供了一种方法来研究复杂膜环境下的蛋白质-蛋白质相互作用，也为今后研究膜环境在跨膜蛋白质-蛋白质相互作用中的意义提供了一种观点。Biochemical and NMR characterization of the interactions of Vav2–SH2 domain with lipids and the EphA2 juxtamembrane region on membrane (Vav2-SH2结构域与脂质和膜上EphA2近膜区相互作用的生化及NMR表征) Biochemical Journal, 12 October 2020, 477: 3791-3801.

•  仪器型号：Beckman Optima MAX-XP Ultracentrifuge.

•  目的：脂质体的制备。

•  离心条件参数: 4 C, 50 000 g, 30 min.

https://doi.org/10.1042/BCJ20200300

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一项采用超速离心技术的研究表明，将胺官能化的纳米金刚石（NDs）封装在脂质体中并进行了研究，以观察其光致发光性质的变化。研究结果表明，功能化的NDs的光致发光特性发生了显着变化，并且在脂质体包封后更有潜力。该发现可用于开发新型水分散型荧光杂交体脂质体-NDs，并具有用于诊断和治疗的药物封装能力（脂质体疗法）。也可以考虑具有为其他生物医学应用定制其相应可能性的全光学传感器。Photoluminescent properties of liposome-encapsulated amine-functionalized nanodiamonds (脂质体封载的胺官能化纳米金刚石的光致发光特性) Nano Express, 27 October 2020, 030009.

•  仪器型号：Beckman Coulter 90 L Ultracentrifuge.

•  目的：脂质体的分离纯化及制备。

•  离心条件参数: 4 C, 38 000 rpm, 1h.

https://doi.org/10.1088/2632-959X/abc1c5

5、

一项采用超速离心技术的研究检测了统计偶联分析（SCA）是否可以应用于菱形蛋白酶（分布最广泛的膜蛋白），以识别独立进化以获得特定功能的氨基酸“区段”，揭示其功能进化的基础。Decoding the Functional Evolution of an Intramembrane Protease Superfamily by Statistical Coupling Analysis (通过统计耦合分析对膜内蛋白酶超家族的功能进化进行解码) Structure, 3 November 2020, 28, 1-8.

•  仪器型号：1. 细胞膜的分离：Beckman Optima Ultracentrifuge, a 70 Ti rotor. 2. 实时动力学分析实验：Optima MAX-XP Ultracentrifuge.

•  目的：1. 细胞膜的分离；2. 实时动力学分析实验中蛋白脂质体的分离与收集。

•  离心条件参数: 1.细胞膜分离：10 C, 370 500 x g, 30 min. 2. 蛋白脂质体的分离：600 000 x g, 30 min.

https://doi.org/10.1016/j.str.2020.07.015