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HTRF TR-FRET技术
HTRF TR-FRET技术
  • 进口
  • 瑞孚迪(Revvity)
  • HTRF TR-FRET
  • 2026-2-26
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用均相时间分辨荧光 (Homogeneous TRF, HTRF) 技术基于时间分辨荧光 (Time Resolved Fluorescence, TRF) 和荧光共振能量转移 (Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET) 两大技术原理,将荧光检测的灵敏性、均相免洗和低背景等特点结合在一起。HTRF 技术已在基础研究,新靶点发现和验证,高通量筛选,候选化合物优化等阶段广泛使用,应用于 GPCRs, 激酶,细胞因子,磷酸化蛋白,表观遗传,生物大分子(抗体)等检测和定量。
 
HTRF 的能量供体是铕 (Eu) 和铽 (Tb) 的穴状化合物。在穴状化合物内,Eu 和 Tb 被永久地嵌合在结构非常稳定的笼状结构内。该结构由 J.M Lehn's 教授发明,并在 1987 年获得了诺贝尔化学奖。穴状结构可以耐受反应体系中的金属离子、EDTA、DMSO、pH 的影响。实验整个操作过程无需避光,荧光基团不会发生光淬灭,可以连续多次激发读值。
 
HTRF 的能量受体有两种,XL665 和 d2。它们的光学性质相同,分子量不同。前者是分子量为 105 kD 的别藻蓝蛋白 (APC),将 APC 的亚基偶联在一起后使其不能解离,提高了稳定性。后者分子量为 1 kD,在特定实验中有独特优势。XL665 和 d2 的激发波长均为 620 nm,发射波长为 665 nm。
 
HTRF 结合 Tag-lite 技术可以将供体探针 (Tb) 和受体探针 (XL665 或 d2) 标记在活细胞表面的蛋白受体(如 GPCR)上,可以用于检测 GPCR 与配体的结合情况,或者是进行 GPCR 同源二聚化实验、GPCR 内源化实验。
 
HTRF 试剂盒的产品组合不断增长,助力科学家对热门适应症的研究能力,包括免疫肿瘤学,神经科学和心脏病学等。除现有试剂盒,HTRF 可提供标记试剂盒和标记定制服务,用于定制开发新的检测靶点和方法。