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柱后衍生法在豆豉腐乳等发酵食品中黄曲霉毒素检测的应用
点击次数:961 发布日期:2021-9-17  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
针对豆豉、腐乳基质可能存在难净化、杂质多的特点,普瑞邦技术工程师根据《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族G族的测定》中半流体样品实验方法及参考文献,进行了免疫亲和柱与多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化对比验证实验,具体实验过程如下:

【标准品】黄曲霉毒素混合标准工作液:1ug/mL

【样品处理】
样品 豆豉(a)腐乳(b)
编号 a1(b1) a2(b2) a3(b3) a4(b4)
处理过程 20mL70%甲醇水 20mL84%乙腈水
超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡 20min
超速离心10min,上清液备用
取提取液4mL过M160固相净化柱 / 取提取液4mL过M160固相净化柱 /
取2mL过柱后液体加18mL水稀释 取提取液2mL加18mL水稀释 取2mL过柱后液体加18mL水稀释 取提取液2mL加18mL水稀释
全部过普瑞邦免疫亲和柱,最终2mL甲醇定容上机
加标水平 5mg/L
 

液相谱图如下:
b1:腐乳70%甲醇提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化
 
 
b2:腐乳70%甲醇提取只过免疫亲和柱净化
 
 
b3:腐乳84%乙腈提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化
 
 
b4:腐乳84%乙腈提取只过免疫亲和柱净化
 
 
a1:豆豉70%甲醇提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化
 
 
a2:豆豉70%甲醇提取只过免疫亲和柱净化
 
 
a3:豆豉84%乙腈提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化
 
 
a4:豆豉84%乙腈提取只过免疫亲和柱净化
 
 
【实验结果】
 
 
通过实验验证,按照以上前处理流程,84%乙腈或70%甲醇提取后,过免疫亲和柱就能达到净化效果,但是70%甲醇提取腐乳、豆豉两种基质回收率偏低,建议实验过程为84%乙腈提取后过免疫亲和柱净化。
 
【液相条件】
流动相:甲醇:水 = 45:55
色谱柱:Pribolab真菌毒素检测专用柱(C18,250×4.6 mm,5 μm)
流速:1.0 mL/min
进样量:10 μL
光化学柱后衍生器:Pribolab® KRC
激发波长:360 nm,发射波长:440 nm。
来源:青岛普瑞邦生物工程有限公司
联系电话:400-6885349;0532-84670748
E-mail:info@pribolab.cn

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