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当前位置 > 产品目录 > 合成/测序/基因/细胞分析/蛋白质组 > > 细胞计数 > Cellometer K2双荧光细胞计数仪
合成/测序/基因/细胞分析/蛋白质组 >
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Cellometer K2双荧光细胞计数仪
Cellometer K2双荧光细胞计数仪
英文名称：Cellometer K2 Cell Counter总访问：14742
国产/进口：进口半年访问：841
产地/品牌：美国/Nexcelom Bioscience产品类别：细胞计数
型       号：Cellometer K2 最后更新：2022-8-19
货       号：
参考报价：021-5886 0038
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销售商： 耐细隆生物仪器（上海）有限公司 查看该公司所有产品 >>
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Cellometer K2 荧光细胞活力分析仪介绍
简单的操作流程
Simple, User-friendly Procedure - pipette load sample for Cellometer K2, cell viability counter
加入20 µl样本
插入计数板
选择实验点击Count
60秒内得到结果！
60秒内即可完成自动细胞计数

Cellometer X2通过明场和荧光成像以及图像识别软件迅速准确地计数细胞，并自动计算和显示细胞数、浓度、直径和存活率%。

Results in less than 30 seconds60秒内完成上样、图片查看、
K2可以让用户：
  • 增加通量
  • 提高准确性
  • 提高结果一致性
  • 确保正确获取所有数据
  • 分析不易计数的细胞（易成团，形状不规则等）
  • 消除判断错误、误数和使用者之间的差异

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原代细胞分析：PBMCs, 肝细胞和其他

Cellometer K2专为原代样本分析而设计，适用样本包括外周血、脐带血、骨髓，以及其他复杂样本：

  • 移植用有核细胞
  • 免疫研究中的PBMCs
  • 疫苗开发中的脾细胞
  • 细胞治疗中的干细胞
  • 肿瘤研究中的肿瘤悬液
 

通过将活的和死的有核细胞染上不同荧光，排除细胞碎片、血小板和红细胞的干扰，K2可精确计算细胞存活率。基于对“复杂”和“干净”样本的精确分析，K2可胜任在细胞处理的多个阶段（细胞收集 – 分离 – 冻存）对细胞状态进行评估。

Cellometer K2可用于分析多种细胞类型，包括：

Hepatocytes - Cellometer K2, cell viability counter Jurkat - Cellometer K2, cell viability counter 
肝细胞
Jurkat
Splenocytes - Cellometer K2, cell viability counter PBMC - Cellometer K2, cell viability counter
脾细胞
PBMC

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双荧光染色法计数活/死有核细胞
绿色荧光活细胞图片
Green fluorescent live cell image - Cellometer K2, cell viability counter
红色荧光死细胞图片
Red fluorescent dead cell image - Cellometer K2, cell viability counter
为什么用双荧光染色法？

仅凭明场下的细胞形态有核和无核细胞难以被区分，而且台盼蓝染色也没有荧光染色对活死细胞的判断灵敏，所以我们强烈建议用双荧光染色法来精确分析原代细胞。K2细胞计数仪预设了多种用AO/PI双荧光染色法来分析原代细胞的应用。

AO/PI染色法
吖啶橙(AO)是一种核酸染料，可以渗透活细胞和死细胞，将所有有核细胞染色并发出绿色荧光。碘化丙啶(PI)只能渗透破损的细胞膜，将所有有核的死细胞染色并发出红色荧光。当细胞被AO和PI同时染色时，由于这两种染料间的荧光共振能量转移(FRET)，所有活的有核细胞会发出绿色荧光，所有死的有核细胞会发出红色荧光。不含核的细胞或杂质不发荧光。

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细胞实验：细胞周期、凋亡和GFP
Cell Cycle
Cell Cycle - Cellometer K2, cell viability counter
 

Cellometer K2可以完成多种细胞实验，比如细胞周期、凋亡和GFP蛋白表达分析。K2的数据可以导出到De Novo FCS Express流式软件进行分析和展示。

用户可以用Nexcelom Bioscience的细胞周期试剂盒对细胞进行染色并分析SubG1, G0/G1, S和G2/M等期所占的比例。用户也可以用Nexcelom Bioscience的Annexin V-FITC/PI和Caspase 3/8试剂盒来分析凋亡细胞的比例。K2还可以分析表达GFP的细胞所占的比例。

K2 SubG1 G0/G1 S G2/M
AVE 1.0% 51.1% 13.6% 31.1%
STD 0.4% 1.6% 1.0% 1.1%
Apoptosis
Apoptosis Negative Control - Cellometer K2, cell viability counter
Untreated (Negative Control)
  Healthy Apoptotic Necrotic Debris
AVE 81.9% 8.1% 4.0% 6.0%
STD 1.6% 1.3% 0.4% 1.1%
CV 1.9% 16.1% 9.3% 18.3%


Apoptosis Positive Control - Cellometer K2, cell viability counter
Treated (Positive Control)
  Healthy Apoptotic Necrotic Debris
AVE 58.8% 24.7% 13.8% 2.7%
STD 1.9% 1.1% 1.2% 0.2%
CV 3.2% 4.3% 9.0% 9.2%

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排除红细胞、血小板或细胞碎片的干扰

AO和PI均是核酸染料。因为大部分成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核，所以只有活的和死的有核细胞才会被染色发出荧光。该方法不需裂解红细胞，能帮助用户节省时间和减少实验步骤。红细胞、血小板和细胞碎片都会在计数时被排除。

荧光染色法计数原代细胞的优势
右边的细胞图片显示了荧光染色法计数原代细胞的优势。明场图片显示了该样本中的有核细胞以及混杂的红细胞和血小板。不过在红色和绿色荧光通道中我们只能看到有核的活/死细胞。
Sample Measurement Total nucleated All RBC % RBC n

PBMC+RBC

Mean

1.26E+07

1.39E+07

1.23E+06

8.9%

10

 

CV

6.2%

8.8%

 

 

 

PBMC+1/2RBC

Mean

1.21E+07

1.27E+07

5.82E+05

4.6%

10

 

CV

4.8%

5.4%

 

 

 

PBMC+1/4RBC

Mean

1.22E+07

1.24E+07

2.27E+05

1.8%

10

 

CV

7.9%

7.3%

 

 

 

将不同数量的红细胞与新鲜的人PBMC混合。在明场通道中计数细胞总数(有核细胞 + 红细胞)；在绿色荧光通道中计数有核细胞。不同浓度的红细胞(1.8%, 4.6%和8.9%)没有影响有核细胞的计数。

Fresh human PBMCs - Cellometer K2, cell viability counter

红细胞在明场图片中被标识出来(左图)；荧光图片只显示发荧光的有核细胞，不显示红细胞(右图)。

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细胞图像可用于数据确认
没有完全相同的两个细胞

用户可通过K2的明场通道查看细胞的形态。

被圈定的细胞图片可用于确认图片的获取和分析是否正确。明场图片可用于普通细胞计数和台盼蓝存活率分析。

被圈定的荧光图片显示被计数的有核活/死细胞，可用于确认原代细胞的分析是否准确。

用户可确认：
  • 基于大小和形态判断细胞计数是否准确
  • 成团细胞计数是否精确
  • 红细胞、血小板、碎片是否被排除
Bright field counted cell image for Data Verification - Cellometer K2, cell viability counter Fluorescent counted cell image for Data Verification - Cellometer K2, cell viability counter

明场图片可用于确认粘连的细胞是否都被计数以及碎片是否被排除。在荧光图片中，被计数的活细胞用绿圈标出，被计数的死细胞用红圈标出。

  • 细胞图片可被保存和导出并用作文献发表和演示
  • 保存的图片可以用默认或自定义参数重新分析

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Cellometer分析原代肝细胞的方法

因为肝细胞的形态不均一、脆弱、易成团，用血球计数板人工计数肝细胞耗费精力且不准确。而且肝细胞的存活率下降很快，如果计数时间太长会导致结果的不准确和不一致。除此以外，肝细胞的质地很脆弱，不能承受鞘液的压力，所以也不适合用流式细胞仪分析。因此，Cellometer图像细胞仪是肝细胞分析的最佳仪器。

双荧光染色步骤

分析存活率时，将20 µl肝细胞样本和20 µl Cellometer AO/PI染料混合。吖啶橙(AO)与DNA结合发出绿色荧光，将肝细胞和碎片区分开。碘化丙啶(PI)只能渗透破损的细胞膜，和死细胞的DNA结合发出红色荧光。当细胞同时被AO和PI染色时，由于FRET (荧光共振能量转移)效应，死细胞中AO发出的绿色荧光被PI吸收，所以死的肝细胞发出红色荧光，活的肝细胞发出绿色荧光。这个染色过程简单、快速，结果准确。


Dual-fluorescence Staining Procedure - Cellometer K2, cell viability counter

明场图片（左）显示了原代肝细胞不均一的形态。双荧光图片（右）显示了被计数的活肝细胞（绿圈）和死肝细胞（红圈）。

Cellometer Analysis - Cellometer K2, cell viability counter
Cellomter分析

和染料混合后立即将20 µl染色的样本加入Cellometer细胞计数板并插入Cellometer K2计数仪，仪器会对板中的细胞自动拍照并计数。因为计数板是一次性的，所以不需清洗，也降低了交叉污染的风险。用户可用预设的原代肝细胞参数分析样本。


成团细胞和形状不规则细胞的分析
NCI-60 细胞系和成团的MCF-7细胞

NCI-60是美国国立卫生研究院(NIH)为药物筛选开发出的59株(原本60株)细胞系。

  • NCI-60系列中有57%的细胞系易成团，含有碎片，或形状和大小有较大差异
  • 所有59株NCI-60细胞系都在Cellometer细胞计数仪上验证过
美国国立癌症研究院(NCI)的所有40所癌症中心都在使用Cellometer细胞计数仪
Clumpy Cells - Cellometer K2, cell viability counter
成团细胞
MCF-7乳腺癌细胞系非常容易成团。Cellometer的模式识别软件可将细胞团中的细胞精确地分别计数(上图)。
Irregular-shaped Cells - Cellometer K2, cell viability counter
形状不规则细胞
用户可调节Cellometer软件的圆度设置来识别形状不规则的细胞，比如RD细胞和激活的T细胞。

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细胞大小分析和基于大小的细胞计数
Cell size histogram from Cellometer K2, cell viability counter

Cellometer K2细胞计数仪会基于细胞直径自动生成细胞大小直方图。

因为Cellometer可生成单个细胞大小的测量结果，所以可将多个样本叠加在一个直方图上，以便分析细胞直径随时间的变化。

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比人工计数快10倍
Hemacytometer under microscope using Cellometer K2, cell viability counter

使用血球计数板人工计数1 x 106个细胞需要花费大约5分钟的时间。同时计数活细胞和死细胞所需时间会在此基础上加倍。Cellometer Auto 2000可以在30秒内得到活细胞和死细胞的数目和浓度以及存活率百分比。

提高数据准确性和一致性
  • 省略清洗步骤
  • 减少判断错误
  • 排除红细胞的干扰
  • 避免记录和计算错误
  • 减少计数时间，提高工作效率
Cellomter准确性
Cellometer K2拥有优越的可重复性，荧光计数和分析结果的CV%都在10%以内。右边数据显示的是用PI染色后的Jurkat细胞的计数和存活率结果。
 
Sample N Value Average Live Cell Concentration % Viability CV of Concentration CV of Viability

Jurkat

 24

3.61E+06

92.2%

8.9%

 1.0%

Human PBMC

 10

5.94E+06

96.0%

4.7%

0.5%

Mouse Splenocyte

 10

1.86E+07

88.6%

5.6%

0.7%

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一次性计数板：无需清洗、无污染
Cellometer disposable images chambers for Cellometer K2, cell viability counter
Cellometer一次性细胞计数板由两个厚度一定的小室组成，利用标准的单通道移液器将20 µl细胞悬液注入小室内，再将细胞计数板插入到Cellometer计数仪后板内的细胞即可以直接被拍照显示。
一次性细胞计数板的优点：
  • 节省时间 – 无需清洗
  • 无交叉污染的风险
  • 降低了对用户的生物危害风险
  • 样品体积可控
  • 针对大细胞有更深更宽的计数板
  • 最为实惠的自动细胞计数仪耗材

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专业的在线和现场技术应用支持
经验丰富的Nexcelom技术支持专家可在北京时间上午9点至下午5点提供电话和在线支持，并可协助：
  • 创建新的细胞类型
  • 计数参数的优化
  • 故障排除
  • 培训新用户
  • Cellometer K2新仪器装机
K2 help
Cellometer K2软件界面右下角的帮助按钮可让用户直接访问：
  • 软件功能和说明书
  • 在线教程和培训视频
  • 提交技术支持申请

所有的Nexcelom应用科学家都100％专注于基于成像原理的细胞计数方法和实验应用。

Nexcelom应用科学家可以支持：
  • 现场演示
  • 培训
  • 故障排除
  • 技术研讨会
bio-equip.com
售后服务
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　 Cellometer K2双荧光细胞计数仪英文彩页，PDF (223次)
　 CAR-T应用英文彩页，PDF (119次)
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