MVX10的工作距离和大视野与体视显微镜无二,但由于数值孔径(NA)增大,因此分辨率更高。MVX10有专门为其设计的0.63X、1X和2X平场复消色差物镜,达到高图像质量。三款物镜配有校正环,图像平场性突出,近红外透过率高,色差校准优异。这样,用户可以从低放大倍数到高放大倍数,非常灵活地实现高效力、快速精准的荧光观察、筛选、成像。
动态
0.63X物镜的最大视野为55mm,能够方便地跟踪快速移动的样本。它的NA高达0.15,大样品(如整个胚胎)的荧光,可在各种放大倍数下达到突出的观察亮度。
平缓
MVX10各光学组件有着超出同类的NA和S/N比,因此样本经光照产生荧光所需的时间更短。这一条也适用于近红外线波段,在近红外线波段,MVX10显微镜有着绝佳的透过特性,因此显微镜可在样本受损最小的情况下,采集整个光谱中的荧光。
从宏观到微观
MVX10采用了双孔位物镜转盘,使用0.63X和2X物镜,将可用变焦范围扩展至31:1。物镜均经过齐焦校准,因此转换物镜后重新聚焦的过程快捷、简单。只需旋转微调稍作调整就可回到光学焦点位置,实现无缝宏观到微观转换。2X物镜同时配有一个校正环,可根据样品中介质调整图片质量。
长工作距离 (W.D.),提高筛选与观察效率
相比体视显微镜,MVX10有着相同的工作距离和更高的NA值(1X物镜条件下,65 mm W.D. 和最高0.25的NA值)。这样,荧光筛选、核查基因表达就非常高效,快速、精确,判断错误减少,用户不必在体视显微镜和倒置显微镜之间切换奔忙。
光学薄膜电压记录 —从样本准备到记录
通过最佳的荧光采集,MVX10能够进行高效的光学薄膜电压记录,而这种记录需要检测荧光的微弱变化。光学薄膜电压记录可被用于进行高速、高信噪比光学记录,以及脑部切片、组织块、离体心脏、动物体内和其它生物样本的准备工作。通过切换的荧光激发块,可对各种荧光探针进行记录。
小鼠小脑神经回路的光记录
通过薄膜电压敏感染色方法,P7小鼠的离体小脑使用针对膜电压敏感的染料(Di-2 ANEPEQ, lnvitrogen Corp.)染色,主橄榄体(内侧副橄榄体)经过刺激,形成神经元回路结构的视觉效果。通过MVX10(MVPLAPO 2XC和6.3X变焦)和高速成像(每秒200帧)系统 (MiCAM02-HR, BrainvisionInc.)获得192 × 128像素空间分辨率的图像,图像作10次平均。上面图像样本中的伪色显示电极刺激橄榄核(箭头所示)产生的电活动的强度和传播。在该放大倍数下,单个像素大小约为7-15微米/像素。
图像右上方的数字代表变焦放大倍数,图像下方的数字代表刺激的时间。右上的波反映的是图像红、黑、蓝圈点所对应的荧光变化。通过MVX10和薄膜电压敏感染色,神经元回路的精细结构能够以极高速度记录。
Akiko Arata博士
Laboratory for Memory and Learning, Neuronal Circuit
Mechanisms Research Group
RIKEN脑科学研究院
利用薄膜电压敏感染色进行神经活动光学记录
上图显示的是老鼠海马脑片(400微米厚)受到电刺激后,Schaffer附属区神经活动的传播。薄膜电压敏感染色(Di-4 ANEPPS, lnvitrogen Corp.) 被用于记录荧光的微小变化。通过 MVX10 (MVPLAPO2XC 与6.3X 变焦)和高速成像系统 (10,000帧/秒)(MiCAM ULTIMA-L, Brainvision Inc.)获得上述图像,图像空间分辨率为100 × 100像素, 作6次平均。在该放大倍数下,单个像素的大小约为8微米/像素。
上述图样中的伪彩显示了电极刺激后电活动的强度与传播。图像下方的数字代表刺激后的帧数和时间长度。波形图反映的是图像红、黑、蓝圈点所对应的荧光变化。通过MVX10显微镜,能够以极高速度记录最优的信噪比。
Yuko Sekino博士与Akihiro Fukushima博士
东京大学医疗科学院基础医疗科学部神经网络科