商品属性:
| 产品名称 |
犬链球菌 STR T1 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Streptococcus canis Devriese et al. |
货号 |
YS-JZ2798 |
| 生长条件 |
37℃;18-24h;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 特殊蛋白胨:23.0g,可溶性淀粉:1.0g,氯化钠:5.0g,琼脂:10.0g,脱纤维羊血:5%(50℃添加),pH:7.3±0.2(25℃)
生长条件 37℃;18-24h;好氧
形态 菌落直径为0.5-1mm,圆形,边缘整齐,不透明,正面黄色,颜色较浅,中间凸起,表面光滑,易挑起,G+(蓝紫色),球菌
分离基物 Bovine mastitic milk
模式菌株 yes
操作步骤 ①准备上述平板2块;②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入2块平板,200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
常规保藏:
1、短期保藏:斜面培养基 2-8℃密封保存,传代次数严格控制在 5 代以内,避免多次传代导致遗传漂变、毒力下降。
2、长期保藏:用 20% 甘油菌液置于 - 80℃超低温冰箱冻存,可稳定保藏 2-5 年,菌株活性与表型无明显变化。
3、活化操作:冻干菌株首次活化需全部溶解使用,接种于添加 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板,37℃厌氧环境下培养 24-48 小时,复苏延迟生长的菌株可适当延长培养时间。
操作步骤:
1. GBS标准菌株复苏与体外活化培养
复苏保存于-80℃超低温环境的GBS模式菌株(ATCC 13813),室温快速复溶后,采用无菌划线技术将菌液接种于5%脱纤维羊血琼脂固体培养基。置于37℃常规恒温培养体系(无CO₂富集条件)培养24~48h,观测菌落表型,筛选出灰白色、表面光滑、呈β-溶血特性的圆形菌落。实验体系严格限定菌株传代次数≤5代,规避长期传代引发的遗传漂变、毒力衰减及功能酶活性丧失等菌株性状变异问题。
2. 临床标本选择性增菌富集处理
对生殖道拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测标本进行即时接种,分别置于LIM肉汤、TransVag选择性增菌液体培养基中进行富集培养。37℃恒温孵育18~24h,利用培养基中庆大霉素与萘啶酸的选择性抑菌作用,抑制非目标杂菌增殖,实现低载量GBS菌株的富集浓缩。该增菌步骤为检测前置必备流程,即便开展分子核酸检测仍需执行,可使检测灵敏度提升90%以上,有效覆盖非溶血表型GBS菌株,降低漏检率。
3. 菌株分离纯化及表型初步鉴定
将增菌富集后的菌液划线接种于GBS特异性显色培养基,35±2℃恒温培养18~24h。筛选培养基上特征性蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落,经革兰氏染色后进行显微形态学观察,目标菌株为革兰氏阳性链状球菌。通过3%过氧化氢溶液进行触酶活性检测,无产气反应可排除触酶阳性葡萄球菌属污染,完成GBS菌株的初步分离鉴定与杂菌剔除。
公司正在出售的产品:
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