堪萨斯分枝杆菌

商品属性：

产品名称	堪萨斯分枝杆菌	规格	冻干粉
英文名称	Mycobacterium kansasii	货号	YS-JZ2790
生长条件	37℃；5-7天；好氧	用途	仅供科研

培养基 硫酸铵：0.5，磷酸二氢钾：1.5，磷酸氢二钠：1.5，柠檬酸钠：0.4，硫酸镁：0.025，氯化钙：0.5mg，硫酸锌：0.001，硫酸铜：0.001，L-谷氨酸钠：0.5，柠檬酸铁铵：0.04，盐酸吡哆醇：0.001，生物素：0.5mg，孔雀石绿：0.25mg，琼脂：15.0，PH：6.4-6.8（25℃）
生长条件 37℃；5-7天；好氧
形态 菌落直径为0.5-1mm，形状不规则，边缘不规则，正面灰白色，形态扁平，表面粗糙，表面灰暗，质地干燥，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯
模式菌株 yes
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

常规保藏：
1、短期保藏条件：斜面培养基于 2–8℃密封保存，传代次数控制在 5 代以内，避免因多次传代引起遗传性状改变及毒力降低。
2、长期保藏条件：采用 20% 甘油菌液于 - 80℃超低温冻存，可稳定保藏 2–5 年，菌株活力与表型无显著改变。
3、活化操作要求：冻干菌株首次活化需完全溶解使用，接种于含 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板，37℃厌氧培养 24–48 小时；对复苏延迟菌株可酌情延长培养时间。

操作步骤：
1. 菌种复苏活化操作
从-80℃冰箱拿出冻存的GBS标准菌种，放在室温下快速化开。用灭菌后的接种环挑取一点菌液，按照四区划线的方法涂在5%脱纤维羊血琼脂平板上。把平板放进37℃培养箱，不用加二氧化碳，培养24到48个小时，长出的菌落如果是灰白色、圆润光滑、带有β溶血环，就是合格的GBS菌落。注意菌种传代不能超过5次，防止菌种变异、毒性变差、酶活性失效。
2. 临床样本增菌处理
采集好的阴道、直肠拭子以及血液、脑脊液等样本，要马上接种到LIM肉汤或者TransVag增菌肉汤里。放在37℃恒温环境培养18~24小时，肉汤里的抗生素能抑制杂菌生长，把样本里少量的GBS集中富集起来。不管后面要不要做核酸检测，都必须先做增菌培养，能大幅提高检测准确率，避免漏掉不溶血的GBS菌株。
3. 菌种纯化和初步检测
取培养好的增菌肉汤，划线涂在GBS显色培养基上，控制温度在35±2℃，培养18~24小时。挑取平板上蓝绿色、紫颜色的可疑菌落，做革兰氏染色，显微镜下看到链状排列的阳性球菌，基本符合GBS特征。再滴上3%过氧化氢，要是没有气泡，就说明不是葡萄球菌，完成初步的筛选鉴定。

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