枯草芽孢杆菌枯草亚种是枯草芽孢杆菌的模式亚种,其核心检测原理围绕菌株的产酶与芽孢形成特性展开,是工业酶制剂、发酵与合成生物学研究应用最广的模式细菌之一。
产品名称:
枯草芽孢杆菌枯草亚种
英文名称:Bacillus subtilis subsp. subtilis
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1412
培养基 营养琼脂:蛋白胨10.0,牛肉浸粉3.0,氯化钠5.0,琼脂15.0,pH7.2±0.2(25℃)
生长条件 30℃;18-24h;好氧;
形态 菌落灰白色,表面干燥粗糙,边缘不齐,G+,杆菌,产芽孢,纯度:纯
分离基物 土壤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板1-2块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
枯草芽孢杆菌枯草亚种属于芽孢杆菌属,基因组具备枯草芽孢杆菌种保守骨架,亚种带有专属遗传标记,可形成内生芽孢,产淀粉酶、蛋白酶相关基因保守。与枯草芽孢杆菌其他亚种遗传存在差异。
二、菌株检测与鉴定核心原理
枯草芽孢杆菌枯草亚种检测采用淀粉水解试验、染色镜检结合分子鉴定;镜检芽孢 + 淀粉平板初筛;扩增亚种特异性基因,鉴定枯草芽孢杆菌枯草亚种。
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冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种长期保藏:未活化菌种置于-20℃低温环境储存。
2、冻干管使用要求:真空冻干封存菌种,开管后菌粉一次性用尽,禁止留存复用。
3、复苏接种要求:菌种以牛奶为保护剂、菌体含量低,复苏菌悬液需全部接种新鲜培养基。
4、培养时长说明:休眠菌种生长延滞期较长,未按时出菌可延长培养24h及以上。
5、菌种使用标准:初代复苏菌种活性不稳,需2次继代培养,活性稳定后方可实验。
6、操作资质与防护:仅限专业人员开管;三级危害菌种在生物安全柜操作,常规菌种在超净台操作,全程做好面部、眼部防护。
7、实验善后规范:全流程无菌操作,实验耗材、器皿经灭菌处理后销毁。
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