拟茎点霉

商品属性：

产品名称	拟茎点霉	规格	冻干粉
英文名称	Phomopsis sp.	货号	YS-JZ1815
生长条件	25℃；5-8d；好氧	用途	仅供科研

培养基 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）：马铃薯浸粉：6.0，葡萄糖：20.0，琼脂：15.0，pH：5.6±0.2（25℃）
生长条件 25℃；5-8d；好氧；
形态 菌落直径为 3-5cm，灰白色，绒状，表面粗糙，分生孢子纺锤形，霉菌，纯度：纯
分离基物 植物病组织
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②生物安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株植物病原真菌研究

常规保藏：
1、短期保藏策略：斜面密封置于 2-8℃条件保存，严格限制传代次数≤5 代，降低遗传漂变、菌株性状退化风险。
2、长期保藏策略：采用 20% 甘油作为保护剂制备菌液，-80℃超低温冻存，可实现 2-5 年稳定保藏，菌株生理活性无显著改变。
3、活化处理流程：冻干菌株全量复溶后接种，在 5% 脱纤维羊血琼脂平板上 37℃厌氧培养 24-48 小时，复苏迟缓菌株可酌情延长培养时间。

操作步骤：
1. 菌株复苏活化
① 解冻：-80℃ GBS标准菌株，室温快速融化；② 接种：无菌四区划线接种5%脱纤维羊血琼脂平板；③ 培养：37℃、无CO₂环境培养24~48h；④ 判读：观察灰白色、β-溶血光滑圆形菌落；⑤ 质控：传代次数≤5代，保障菌株性状稳定。
2. 样本选择性增菌
① 接种：临床GBS样本即时接种LIM/TransVag增菌肉汤；② 培养：37℃恒温孵育18~24h；③ 作用：抗生素抑制杂菌，富集低浓度GBS；④ 规范：所有检测样本必做增菌，提升检测灵敏度，防止非溶血菌株漏检。
3. 分离纯化与初步鉴定
① 接种：增菌肉汤划线接种GBS显色培养基；② 培养：35±2℃孵育18~24h；③ 初筛：挑取蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落；④ 镜检：革兰氏染色，确认阳性链状球菌；⑤ 试验：3%过氧化氢触酶试验，无气泡即为阴性，完成初步鉴定。

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