尖镰孢西瓜专化型

商品属性：

产品名称	尖镰孢西瓜专化型	规格	冻干粉
英文名称	Fusarium oxysporum f.sp. niveum W.C. Snyder & H.N. Hansen	货号	YS-JZ1792
生长条件	25℃；4-7d；好氧	用途	仅供科研

培养基 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）：马铃薯浸粉：6.0，葡萄糖：20.0，琼脂：15.0，pH：5.6±0.2（25℃）
生长条件 25℃；4-7d；好氧；
形态 菌落直径为 3-6cm，白色至浅紫色，棉絮状，表面粗糙，产生镰刀形分生孢子，霉菌，纯度：纯
分离基物 西瓜病株
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②生物安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株西瓜枯萎病研究

常规保藏：
1、短期贮存：斜面培养物经密封处理后，于 2-8℃环境存放，传代次数严格管控不高于 5 代，杜绝因反复传代引发菌株遗传变异与毒力衰减。
2、长期贮存：将菌株制备为 20% 甘油菌液，放入 - 80℃超低温冰箱冻存，保存周期可达 2-5 年，菌株活性与表型特征保持稳定。
3、复苏操作：冻干菌株初次活化需完全溶解后使用，接种至添加 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板，37℃厌氧培养 24-48 小时，生长缓慢菌株可延长培养时长。

操作步骤：
1. 菌株复苏活化（含性状质控）
合规取出-80℃超低温保存GBS标准菌株（ATCC 13813），室温快速解冻，全程恪守无菌操作规范。采用四区划线法将菌液接种至5%脱纤维羊血琼脂平板，37℃无CO₂条件下培养24~48h。菌落质控标准：合格菌落为灰白色、圆形光滑、β-溶血阳性。菌株传代质控：严格限制传代次数≤5代，防止菌株遗传性状、毒力及酶学特性发生改变，保障实验结果准确性。
2. 样本前处理增菌（含流程质控）
所有临床GBS检测样本（拭子、血液、脑脊液）采样后立即接种选择性增菌肉汤，37℃孵育18~24h。利用增菌肉汤的选择性抑菌体系，抑制杂菌生长、富集目标GBS菌株。核心质控要求：增菌步骤为强制性前置流程，全覆盖核酸检测、培养检测等所有检测方式，可提升90%以上检测灵敏度，规避非溶血GBS菌株漏检风险。
3. 分离纯化鉴定（含结果初筛质控）
增菌后样本划线接种GBS显色培养基，35±2℃培养18~24h。筛选显色特征菌落进行革兰氏染色镜检，质控形态为革兰氏阳性链状球菌。同步开展触酶试验，以3%过氧化氢为试剂，无气泡生成判定为触酶阴性，有效排除葡萄球菌属杂菌污染，完成合规性初步鉴定筛选。

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