尖镰孢黄瓜专化型

商品属性：

产品名称	尖镰孢黄瓜专化型	规格	冻干粉
英文名称	Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum	货号	YS-JZ1789
生长条件	25℃；4-7d；好氧	用途	仅供科研

培养基 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）：马铃薯浸粉：6.0，葡萄糖：20.0，琼脂：15.0，pH：5.6±0.2（25℃）
生长条件 25℃；4-7d；好氧；
形态 菌落直径为 3-6cm，白色至浅紫色，棉絮状，表面粗糙，产生镰刀形分生孢子，霉菌，纯度：纯
分离基物 黄瓜病株
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②生物安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株黄瓜枯萎病研究

常规保藏：
1、短期存放：斜面密封冷藏于 2-8℃，传代不超过 5 代，防止菌株变异、毒力降低。
2、长期存放：20% 甘油菌液 - 80℃超低温冻存，可稳定保存 2-5 年，菌株活性不受影响。
3、活化方法：冻干菌完全溶解后接种 5% 羊血平板，37℃厌氧培养 24-48 小时，生长慢可延长培养时间。

操作步骤：
1. 菌种复苏活化操作
从-80℃冰箱拿出冻存的GBS标准菌种，放在室温下快速化开。用灭菌后的接种环挑取一点菌液，按照四区划线的方法涂在5%脱纤维羊血琼脂平板上。把平板放进37℃培养箱，不用加二氧化碳，培养24到48个小时，长出的菌落如果是灰白色、圆润光滑、带有β溶血环，就是合格的GBS菌落。注意菌种传代不能超过5次，防止菌种变异、毒性变差、酶活性失效。
2. 临床样本增菌处理
采集好的阴道、直肠拭子以及血液、脑脊液等样本，要马上接种到LIM肉汤或者TransVag增菌肉汤里。放在37℃恒温环境培养18~24小时，肉汤里的抗生素能抑制杂菌生长，把样本里少量的GBS集中富集起来。不管后面要不要做核酸检测，都必须先做增菌培养，能大幅提高检测准确率，避免漏掉不溶血的GBS菌株。
3. 菌种纯化和初步检测
取培养好的增菌肉汤，划线涂在GBS显色培养基上，控制温度在35±2℃，培养18~24小时。挑取平板上蓝绿色、紫颜色的可疑菌落，做革兰氏染色，显微镜下看到链状排列的阳性球菌，基本符合GBS特征。再滴上3%过氧化氢，要是没有气泡，就说明不是葡萄球菌，完成初步的筛选鉴定。

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