聚多曲霉是曲霉属中的一种丝状真菌,其核心检测原理围绕菌株的次级代谢与产酶特性展开,常用于海洋真菌与生物活性物质研究。
产品名称:
聚多曲霉
英文名称:Aspergillus sydowii
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1401
培养基 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA):马铃薯浸粉6.0,葡萄糖20.0,琼脂15.0,pH5.6±0.2(25℃)
生长条件 25℃;4-6d;好氧;
形态 菌落蓝绿色,绒状,分生孢子头球形,霉菌,纯度:纯
分离基物 土壤/海洋
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板1-2块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
聚多曲霉属于曲霉属真菌,基因组具备曲霉属保守基因,分生孢子头呈聚生特征,物种特有序列稳定。产孢基因保守,与酱油曲霉、焦曲霉遗传可区分。
二、菌株检测与鉴定核心原理
聚多曲霉检测采用镜检分生孢子头形态结合分子鉴定;镜检孢子结构初筛曲霉;扩增 ITS 序列比对,区分聚多曲霉。
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冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、针对未开展活化复苏的冻干粉菌种,长期保藏的最优条件为-20℃低温环境,可有效维持菌种休眠活性。
2、冻干菌种采用真空冷冻干燥工艺制备封存,菌体处于密闭休眠状态,开启后的冻干管菌粉无法二次保存,必须一次性用完。
3、该类冻干粉载体主要为牛奶保护剂,有效菌体占比较少,复苏时不得留存菌悬液,需全部接种于新鲜无菌培养基,保证复苏成功率。
4、休眠态冻干菌种复苏后存在生长延迟现象,若未达到说明书培养时长仍无菌落生长,可顺延培养时间,持续培养24小时甚至更久,观察菌落生长情况。
5、初代复苏菌种活性波动较大,不具备实验稳定性,需完成两次继代传代培养,待菌种生理活性稳定后,方可投入后续实验使用。
6、冻干管开启属于专业微生物操作,仅限持证专业人员执行;依据菌种生物危害等级,三级危害菌种需在生物安全柜操作,常规标准菌种可在超净台操作,操作全程规范佩戴防护用具,规避眼部、面部损伤风险。
7、菌种复苏全流程操作需在无菌净化设备内完成,实验结束后所有接触菌种的器皿、耗材,必须经过高压灭菌处理,合规销毁,杜绝生物污染。
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