商品属性:
| 产品名称 |
桦褐孔菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Inonotus obliquus (Ach. ex Pers.) Pilát |
货号 |
YS-JZ1779 |
| 生长条件 |
25℃;10-15d;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA):马铃薯浸粉:6.0,葡萄糖:20.0,琼脂:15.0,pH:5.6±0.2(25℃)
生长条件 25℃;10-15d;好氧;
形态 菌落直径为 3-5cm,白色至黄褐色,菌丝浓密绵状,不透明,后期形成黑色块状菌核,真菌,纯度:纯
分离基物 桦树腐木
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株食药用真菌(桦褐孔菌)研究
常规保藏:
1、短期保藏策略:斜面密封置于 2-8℃条件保存,严格限制传代次数≤5 代,降低遗传漂变、菌株性状退化风险。
2、长期保藏策略:采用 20% 甘油作为保护剂制备菌液,-80℃超低温冻存,可实现 2-5 年稳定保藏,菌株生理活性无显著改变。
3、活化处理流程:冻干菌株全量复溶后接种,在 5% 脱纤维羊血琼脂平板上 37℃厌氧培养 24-48 小时,复苏迟缓菌株可酌情延长培养时间。
操作步骤:
1. GBS标准菌株复苏与体外活化培养
复苏保存于-80℃超低温环境的GBS模式菌株(ATCC 13813),室温快速复溶后,采用无菌划线技术将菌液接种于5%脱纤维羊血琼脂固体培养基。置于37℃常规恒温培养体系(无CO₂富集条件)培养24~48h,观测菌落表型,筛选出灰白色、表面光滑、呈β-溶血特性的圆形菌落。实验体系严格限定菌株传代次数≤5代,规避长期传代引发的遗传漂变、毒力衰减及功能酶活性丧失等菌株性状变异问题。
2. 临床标本选择性增菌富集处理
对生殖道拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测标本进行即时接种,分别置于LIM肉汤、TransVag选择性增菌液体培养基中进行富集培养。37℃恒温孵育18~24h,利用培养基中庆大霉素与萘啶酸的选择性抑菌作用,抑制非目标杂菌增殖,实现低载量GBS菌株的富集浓缩。该增菌步骤为检测前置必备流程,即便开展分子核酸检测仍需执行,可使检测灵敏度提升90%以上,有效覆盖非溶血表型GBS菌株,降低漏检率。
3. 菌株分离纯化及表型初步鉴定
将增菌富集后的菌液划线接种于GBS特异性显色培养基,35±2℃恒温培养18~24h。筛选培养基上特征性蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落,经革兰氏染色后进行显微形态学观察,目标菌株为革兰氏阳性链状球菌。通过3%过氧化氢溶液进行触酶活性检测,无产气反应可排除触酶阳性葡萄球菌属污染,完成GBS菌株的初步分离鉴定与杂菌剔除。
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