黄曲霉是产生黄曲霉毒素的重要产毒真菌,也是工业产酶菌株,其核心检测原理围绕菌株的黄曲霉毒素生物合成基因簇展开,是食品安全与真菌毒素研究最重要的模式菌之一。
产品名称:
黄曲霉
英文名称:Aspergillus flavus
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1342
培养基 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA):马铃薯浸粉6.0,葡萄糖20.0,琼脂15.0,pH5.6±0.2(25℃)
生长条件 25-28℃;3-5d;好氧;
形态 菌落黄绿色,绒状或絮状,分生孢子头放射状,可产黄曲霉毒素,霉菌,纯度:纯
分离基物 粮食/土壤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板1-2块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
黄曲霉属于曲霉属真菌,基因组含有黄曲霉毒素合成基因簇,为该菌种标志性遗传特征。物种特有核酸序列稳定,产孢与毒素合成基因保守,可与黄柄曲霉等近缘曲霉区分。
二、菌株检测与鉴定核心原理
黄曲霉检测采用形态镜检结合毒素相关基因分子鉴定。镜检分生孢子头初步判定曲霉;扩增黄曲霉毒素合成相关特异性基因,区分黄曲霉与其他曲霉。
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冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种低温保藏规范:未进行活化复苏的冻干菌种,长期储存环境温度需稳定维持在-20℃,可最大限度保留菌种休眠活性,延缓菌种失活。
2、冻干管使用规范:真空冷冻干燥封装的冻干菌种,其真空密封环境一旦破坏,菌粉极易受潮失活,因此开管后必须一次性完全使用,严禁留存备用。
3、菌种复苏规范:本冻干菌种采用牛奶作为冻干保护基质,有效菌体占比极低,复苏操作中需将全部重悬菌液接种于新鲜无菌培养基,杜绝部分接种,规避复苏失效问题。
4、菌种培养规范:休眠态冻干菌种复苏后存在明显生长延滞期,若未在说明书规定培养周期内观察到菌落生长,可在适配的温度、通气、光照等环境条件下延长培养时长。
5、菌种应用规范:初代复苏菌种生理活性、遗传性状尚未稳定,需经过两次连续继代培养,确认菌种生长状态稳定后,方可应用于各类科研、实验检测工作。
6、无菌操作规范:冻干管开启操作属于微生物专项操作,必须由专业实验人员执行;生物危害三级菌种需在二级及以上生物安全柜操作,常规标准菌种可在洁净超净台操作,全程落实个人防护,防止玻璃碎屑飞溅损伤眼部、面部。
7、实验消杀规范:菌种复苏全流程需在无菌净化设备内开展,实验结束后,所有接触菌种的器皿、废弃物必须经过彻底灭菌处理,合规无害化销毁。
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