环状芽孢杆菌是环糊精生产的重要工业菌株,其核心检测原理围绕菌株的环糊精葡萄糖基转移酶合成特性展开,是环糊精生物制造领域应用广泛的菌株。
产品名称:
环状芽孢杆菌
英文名称:Bacillus circulans
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1337
培养基 营养琼脂:蛋白胨10.0,牛肉浸粉3.0,氯化钠5.0,琼脂15.0,pH7.2±0.2(25℃)
生长条件 30℃;24-48h;好氧;
形态 菌落灰白色,表面粗糙,边缘不齐,G+,杆菌,产芽孢,纯度:纯
分离基物 土壤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板1-2块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
环状芽孢杆菌属于芽孢杆菌属,基因组含有芽孢杆菌保守基因,可形成内生芽孢,孢子丝环状为物种特征。物种特有序列稳定,芽孢形成基因保守,可与高地芽胞杆菌等同属菌种区分。
二、菌株检测与鉴定核心原理
环状芽孢杆菌检测采用染色镜检、生化试验结合分子鉴定。镜检观察芽孢形态,生化反应初筛芽孢杆菌;扩增物种特异性基因,区分环状芽孢杆菌与其他芽孢杆菌。
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磷脂酶D(PLD)重组蛋白 |
冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种未活化、需长期储存时,可置于-20℃环境低温保存,保障菌种活性。
2、本冻干菌种为真空冷冻干燥封存状态,冻干管一经开启,菌粉需一次性全部使用,严禁留存二次复用。
3、菌种冻干粉以牛奶为主要保护剂,菌体含量占比低,复苏过程中需将制备的全部菌悬液接种至新鲜培养基,避免因菌体不足导致复苏失败。
4、冻干菌种处于休眠状态,复苏后生长延滞期可能偏长,若未在规定培养周期内长出菌落,可在适配培养环境中延长培养24小时及以上,直至菌落正常生长。
5、新鲜复苏的菌种活性不稳定,常规需连续继代培养2代,待活性稳定后,方可用于各类实验操作。
6、冻干管开启操作需由专业微生物实验人员完成,三级生物危害菌种必须在生物安全柜内操作,普通标准菌种可在超净台操作;全程做好个人防护,重点防护面部,防止玻璃碎片溅入眼部。
7、所有开管、复苏操作均需在无菌安全设备内进行,实验结束后,全部实验器皿需经灭菌处理后再统一销毁。
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