约氏乳杆菌

商品属性：

产品名称	约氏乳杆菌	规格	冻干粉
英文名称	Lactobacillus johnsonii	货号	YS-JZ1711
生长条件	37℃；48h；微厌氧	用途	仅供科研

培养基 MRS培养基：蛋白胨：10.0，牛肉浸粉：8.0，酵母提取物：4.0，葡萄糖：20.0，吐温80：1.0，磷酸氢二钾：2.0，乙酸钠：5.0，柠檬酸三铵：2.0，硫酸镁：0.2，硫酸锰：0.05，琼脂：15.0，pH：6.2±0.2（25℃）
生长条件 37℃；48h；微厌氧；
形态 菌落直径为 0.5-1mm，乳白色，细小，圆形，边缘整齐，不透明，表面光滑，质地湿润，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯
分离基物 肠道
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株益生菌与肠道微生态研究

常规保藏：
短期保存：斜面培养物密封置于 2–8℃，严格控制传代次数≤5 代，避免遗传漂变与毒力减弱。
长期保存：制备 20% 甘油菌悬液，-80℃超低温冻存，可稳定保藏 2–5 年，表型与活性无明显变化。
活化步骤：冻干菌株全量溶解后接种，在 5% 羊血琼脂上 37℃厌氧培养 24–48 小时，复苏慢的菌株可延长培养。

操作步骤：
1. 菌种复苏活化操作
从-80℃冰箱拿出冻存的GBS标准菌种，放在室温下快速化开。用灭菌后的接种环挑取一点菌液，按照四区划线的方法涂在5%脱纤维羊血琼脂平板上。把平板放进37℃培养箱，不用加二氧化碳，培养24到48个小时，长出的菌落如果是灰白色、圆润光滑、带有β溶血环，就是合格的GBS菌落。注意菌种传代不能超过5次，防止菌种变异、毒性变差、酶活性失效。
2. 临床样本增菌处理
采集好的阴道、直肠拭子以及血液、脑脊液等样本，要马上接种到LIM肉汤或者TransVag增菌肉汤里。放在37℃恒温环境培养18~24小时，肉汤里的抗生素能抑制杂菌生长，把样本里少量的GBS集中富集起来。不管后面要不要做核酸检测，都必须先做增菌培养，能大幅提高检测准确率，避免漏掉不溶血的GBS菌株。
3. 菌种纯化和初步检测
取培养好的增菌肉汤，划线涂在GBS显色培养基上，控制温度在35±2℃，培养18~24小时。挑取平板上蓝绿色、紫颜色的可疑菌落，做革兰氏染色，显微镜下看到链状排列的阳性球菌，基本符合GBS特征。再滴上3%过氧化氢，要是没有气泡，就说明不是葡萄球菌，完成初步的筛选鉴定。

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