商品属性:
| 产品名称 |
拥挤棒杆菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Corynebacterium accolens |
货号 |
YS-JZ1701 |
| 生长条件 |
37℃;24-48h;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 营养琼脂:蛋白胨:10.0,牛肉浸粉:3.0,氯化钠:5.0,琼脂:15.0,pH:7.2±0.2(25℃)
生长条件 37℃;24-48h;好氧;
形态 菌落细小灰白色,G+(蓝紫色),棒状杆菌,排列拥挤,纯度:纯
分离基物 人体皮肤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 皮肤微生物研究
常规保藏:
短期保藏:斜面培养基密封后在 2–8℃条件下保存,传代次数不得超过 5 代,以避免多次传代造成性状变异。
长期保藏:使用 20% 甘油菌液于 - 80℃超低温冰箱冻存,可稳定保存 2–5 年,菌株活力与表型保持稳定。
活化操作:冻干菌株首次活化需完全溶解,接种于含 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板,37℃厌氧培养 24–48 小时,生长迟缓菌株可适当延长培养。
操作步骤:
1. GBS标准菌株复苏与体外活化培养
复苏保存于-80℃超低温环境的GBS模式菌株(ATCC 13813),室温快速复溶后,采用无菌划线技术将菌液接种于5%脱纤维羊血琼脂固体培养基。置于37℃常规恒温培养体系(无CO₂富集条件)培养24~48h,观测菌落表型,筛选出灰白色、表面光滑、呈β-溶血特性的圆形菌落。实验体系严格限定菌株传代次数≤5代,规避长期传代引发的遗传漂变、毒力衰减及功能酶活性丧失等菌株性状变异问题。
2. 临床标本选择性增菌富集处理
对生殖道拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测标本进行即时接种,分别置于LIM肉汤、TransVag选择性增菌液体培养基中进行富集培养。37℃恒温孵育18~24h,利用培养基中庆大霉素与萘啶酸的选择性抑菌作用,抑制非目标杂菌增殖,实现低载量GBS菌株的富集浓缩。该增菌步骤为检测前置必备流程,即便开展分子核酸检测仍需执行,可使检测灵敏度提升90%以上,有效覆盖非溶血表型GBS菌株,降低漏检率。
3. 菌株分离纯化及表型初步鉴定
将增菌富集后的菌液划线接种于GBS特异性显色培养基,35±2℃恒温培养18~24h。筛选培养基上特征性蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落,经革兰氏染色后进行显微形态学观察,目标菌株为革兰氏阳性链状球菌。通过3%过氧化氢溶液进行触酶活性检测,无产气反应可排除触酶阳性葡萄球菌属污染,完成GBS菌株的初步分离鉴定与杂菌剔除。
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