芽枝状枝孢

商品属性：

产品名称	芽枝状枝孢	规格	冻干粉
英文名称	Cladosporium cladosporioides	货号	YS-JZ1676
生长条件	25-28℃；4-7d；好氧	用途	仅供科研

 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂：马铃薯浸粉：6.0，葡萄糖：20.0，琼脂：15.0，pH：5.6±0.2（25℃）
生长条件 25-28℃；4-7d；好氧；
形态 菌落橄榄绿褐色，分生孢子链生，有隔菌丝，纯度：纯
分离基物 植物
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②生物安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 植物病原真菌研究

常规保藏：
1、短期保藏：斜面培养物 2–8℃密闭保存，严格限制传代次数≤5 代，减少遗传漂移与毒力衰减。
2、长期保藏：以 20% 甘油保护剂制备菌悬液，-80℃超低温冰箱冻存，可稳定保藏 2–5 年，表型与活性稳定。
3、活化步骤：冻干菌株全量复溶后接种，在添加 5% 脱纤维羊血的血平板上 37℃厌氧培养 24–48 小时；生长缓慢菌株可延长培养。

操作步骤：
1. 标准菌株复苏与活化培养
提前准备-80℃超低温保存的GBS标准菌株（代表性菌株ATCC 13813），取出后立即置于室温环境快速解冻，避免低温长时间放置影响菌株活性。全程无菌操作，使用灭菌接种环蘸取适量融化菌液，采用标准四区划线接种技术，均匀涂布于5%脱纤维羊血琼脂平板表面。将平板倒置放入37℃恒温培养箱，无需补充二氧化碳气体，持续培养24~48小时。培养后观察菌落形态，正常GBS菌落为灰白色、表面光滑、边缘圆润，具备典型β-溶血环。为保障菌株性状稳定，实验全程严格控制传代次数，最大传代次数不超过5代，从源头避免菌株遗传漂变、毒力下降、酶活性丢失等实验误差。
2. 临床样本前处理及选择性增菌培养
收集阴道、直肠拭子及血液、脑脊液等临床疑似GBS感染样本，采样后立即进行接种处理，避免样本放置过久导致菌株失活、杂菌过度增殖。将样本分别接种于LIM肉汤或TransVag专用选择性增菌肉汤中，混匀后置于37℃恒温培养环境孵育18~24小时。该类增菌肉汤含庆大霉素、萘啶酸双重抑菌成分，可有效抑制样本中杂菌繁殖，针对性富集低丰度GBS菌株。实验质控要求：无论后续采用何种检测方式（含核酸检测），前置选择性增菌步骤为必做流程，可使GBS检出灵敏度提升90%以上，有效解决非溶血表型GBS菌株漏检问题。
3. 目标菌株分离纯化与初步鉴别
取孵育完成的增菌肉汤培养液，严格无菌操作下划线接种于GBS专用显色培养基，设置培养温度35±2℃，恒温避光培养18~24小时。培养结束后观察平板菌落特征，筛选出蓝绿色、紫罗兰色的典型可疑菌落。对可疑菌落进行革兰氏染色制片，通过光学显微镜观察菌体形态，GBS菌株呈现革兰氏阳性、链式排列的球菌形态。随后开展触酶试验验证，向菌落样本滴加足量3%过氧化氢试剂，观察无气泡生成，可完全排除触酶阳性的葡萄球菌属杂菌，最终完成GBS菌株的初步纯化与鉴定。

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